文档介绍：该【基因工程酵母基因工程 】是由【知识徜徉土豆】上传分享，文档一共【37】页，该文档可以免费在线阅读，需要了解更多关于【基因工程酵母基因工程 】的内容，可以使用淘豆网的站内搜索功能，选择自己适合的文档，以下文字是截取该文章内的部分文字，如需要获得完整电子版，请下载此文档到您的设备，方便您编辑和打印。基因工程酵母基因工程
基因工程酵母基因工程
第1页
E 酵母菌表示系统
C 酵母菌载体系统
B 酵母菌宿主系统
A 酵母菌作为表示外源基因受体菌特征
F 利用重组酵母生产乙肝疫苗
D 酵母菌转化系统
基因工程酵母基因工程
第2页
A 酵母菌作为表示外源基因受体菌特征
酵母菌分类学特征
酵母菌（Yeast）是一群以芽殖或裂殖方式进行无性繁殖单细胞真核生物，分属于子囊菌纲（子囊酵母菌）、担子菌纲（担子酵母菌）、半知菌类（半知酵母菌），共由56个属和500多个种组成。酵母菌是最成熟真核生物表示系统。
基因工程酵母基因工程
第3页
A 酵母菌作为表示外源基因受体菌特征
酵母菌表示外源基因优势
全基因组测序，基因表示调控机理比较清楚，遗传操作简便
能将外源基因表示产物分泌至培养基中
含有原核细菌无法比拟真核蛋白翻译后加工系统
大规模发酵历史悠久、技术成熟、工艺简单、成本低廉
不含有特异性病毒、不产内毒素，美国FDA认定为安全基因工程受体系统(Generally Recognized As Safe GRAS)
酵母菌是最简单真核模式生物
基因工程酵母基因工程
第4页
B 酵母菌宿主系统
提升重组蛋白表示产率突变宿主菌
抑制超糖基化作用突变宿主菌
降低泛素依赖型蛋白降解作用突变宿主菌
广泛用于外源基因表示酵母宿主菌
基因工程酵母基因工程
第5页
当前已广泛用于外源基因表示和研究酵母菌包含：
酵母属 如酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）
克鲁维酵母属 如乳酸克鲁维酵母（Kluyveromyces lactis）
毕赤酵母属 如巴斯德毕赤酵母（Pichia pastoris）
裂殖酵母属 如非洲酒裂殖酵母（Schizosaccharomyces pombe）
汉逊酵母属 如多态汉逊酵母（Hansenula polymorpha）
其中酿酒酵母遗传学和分子生物学研究最为详尽，但巴斯德毕赤酵母表示外源基因最理想。
基因工程酵母基因工程
第6页
提升重组蛋白表示产率突变宿主菌
能造成酿酒酵母中重组蛋白产量提升或质量改进突变类型
ssc1 改进重组蛋白分泌
ssc2 提升重组蛋白表示
rgr1 提升重组蛋白表示
ose1 提升重组蛋白表示
ssc11 改进重组蛋白分泌
rho- 提升重组蛋白表示
突变类型
生物效应
基因工程酵母基因工程
第7页
抑制超糖基化作用突变宿主菌
能抑制超糖基化突变类型
mnn 甘露糖生物合成缺点型
alg 天门冬酰胺侧链糖基化缺点型
och 外侧糖链添加缺点型
突变类型
生物效应
许多真核生物蛋白质在其天冬酰胺侧链上接有寡糖基团，经常影响蛋白质生物活性。整个糖单位由糖基关键和外侧糖链两个别组成。
酵母菌普遍拥有蛋白质糖基化系统，但野生型酿酒酵母对异源蛋白糖基化反应极难控制，呈超糖基化倾向，所以选择超糖基化缺点株非常主要。
基因工程酵母基因工程
第8页
降低泛素依赖型蛋白降解作用突变宿主菌
泛素介导蛋白质降解作用
蛋白酶体
Lys
HOOC
Ubiquitin 76 aa
ubiquitin ligase E3
Lys
ubiquitin ligase E3
Lys
靶蛋白
靶蛋白
靶蛋白
基因工程酵母基因工程
第9页
酵母菌泛素依赖型蛋白降解系统编码基因
酵母菌共有四个泛素编码基因：
UBI 1 编码泛素-羧基延伸蛋白52（CEP52） 对数生长久表示 稳定时关闭
UBI 2 编码泛素-羧基延伸蛋白52（CEP52） 对数生长久表示 稳定时关闭
UBI 3 编码泛素-羧基延伸蛋白76（CEP76） 对数生长久表示 稳定时关闭
UBI 4 编码泛素五聚体 对数生长久关闭 稳定时表示
酵母菌共有七个泛素连接酶基因：
UBC 1、UBC 2、UBC 3、UBC 4、UBC 5、UBC 6、UBC 7
基因工程酵母基因工程
第10页