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我国全国范围内,当前已知蛇类包含亚种在内快要两百种。其中毒蛇约占四分之一。除蝮蛇广为分布在我国东北、华北、华中,和西南地域外,其它大都分布于南方诸省。我国产有近五十种毒蛇中,含有剧毒且对人畜危害较大者,计有十各种。
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白 眉 蝮
灰蓝扁尾海蛇
尖 吻 蝮
金 环 蛇
眼镜王蛇
银 环 蛇
烙铁头
圆 斑 蝰
舟山眼镜蛇
白唇竹叶青
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蛇毒
蛇毒是从毒蛇毒腺中分泌出来一个毒液,属于生物毒素。
普通蛇毒新鲜毒液呈蛋清样粘稠弱酸性,有特殊腥味,含水量约为65%~80%,~,常温下易失活,置冰箱中1周后有部分失去活力。
蛇毒中蛋白类物质是蛇毒主要毒性成份,包含蛇毒素和酶两大类,所以遇重金属离子、乙醇、酚类物质时,马上产生沉淀;高温环境产生絮状沉淀;遇氧化剂(MnSO4、H2O2)、还原剂(亚硫酸钠)、强酸、强碱等易被破坏,亦易被蛋白水解酶所分解;紫外线照射也能使蛇毒失活。经甲醛处理后失去毒性,但仍保持其抗原性,或变成类毒素。
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抗蛇毒血清定义
抗蛇毒血清是用蛇毒作为抗原 ,给试验动物重复进行注射免疫 ,一定时间后使试验动物产生一定要求量抗体 ,然后采血分离提纯而成 ,是专供治疗毒蛇咬伤特异性生物制品 ,同时为蛇伤患者提供速效、高效、特效药品。注射抗蛇毒血清使人体马上取得对对应蛇毒抵抗力 ,以中和蛇毒毒性作用 ,这就是蛇伤人工被动免疫。
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抗蛇毒血清作用原理
抗蛇毒血清是以蛇毒作为抗原免疫动物,动物受抗原刺激后,产生一系列免疫反应,抗原经巨噬细胞各类酶作用下,抗原决定蔟与巨噬细胞mRNA结合,将抗原(蛇毒)信息传递给T细胞,由T细胞传给B细胞,B细胞受到刺激产生抗体。所以抗蛇毒血清利用该原理制备抗体,能与该抗原(蛇毒)特异性结合,形成抗原抗体复合物,使蛇毒失去毒性作用
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抗蛇毒血清制备
抗蛇毒血清制备首要条件是蛇毒(抗原)、动物(免疫对象)和纯化设备(抗体提纯)。
1、抗原制备:选择健康蛇取毒,新鲜毒液经.2500转离心处理15分钟左右,以除去杂质,上清经冻干成粉状备用。干燥之蛇毒需测定其毒力,应选择毒性强、抗原谱广(免疫电泳检验)蛇毒作为抗原。
2、动物免疫:免疫用动物可用兔、羊、马等,常选取马匹是因为马体大采血量多。
基础免疫:注射第一针或第二针后休息一个月或二个月再开始免疫,称其为基础免疫,简称为基免。
超免:基免后休息两个月,开始正式免疫,通常每星期注射一针,剂量由小渐渐增人,称超免,普通连续注射5-6针后试血,测定血液中抗体水平,直至免疫成功。
免疫成功马匹可采血,按马匹体重进行采血,通常采二次血,间隔一天。
3、抗体提纯:免疫球蛋白纯化有各种,有盐析法(硫酸铵、硫酸钠法),冷乙醇沉淀法,离子交换层析法、凝胶过滤法、电泳法等等。其中以硫酸铵盐析法最方便,也最经济,提取蛋白质活性也比较稳定。缺点是纯度稍差些,若要高纯度球蛋白经常是几个方法结合在一起使用可到达理想效果。商业上大规模纯化抗体常采取盐析法,产品也能到达要求要求。
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种类
单价、双价和多价抗蛇毒血清
(1)单价抗蛇毒血清:是以一个蛇毒为抗原免疫动物,使动物产生抗体,经纯化后抗体只能中和该种蛇毒,称单价抗蛇毒血清。比如:用银环蛇毒免疫动物,使动物产生抗银环蛇毒抗体,纯化制备成抗蛇毒血清只能中和银环蛇毒。也即只能治疗一个毒蛇咬伤。
(2)双价和多价抗蛇毒血清:以两种或两种以上蛇毒对动物进行免疫,制备成抗蛇毒血清能够中和两种或两种以上蛇毒,称双价和多价抗蛇毒血清。临床上能够治疗两种或两种以上毒蛇咬伤。
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