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试验室规章制度及试验室安全讲解
学生分组
分小组配置相关溶液:操作
动物致死法及取材: 操作
细胞标本制备:操作
尸体解剖取材:讲解
活检标本取材:讲解
组织样品固定:操作
免疫组化实验课
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试验室规章制度及试验室安全
⑴ 熟悉你所使用化学物质特征和潜在危害。
⑵ 检验设备性能,充分考虑到使用设备不足。
⑶ 工作中碰到疑问,及时请教技术责任人以及有丰富知识专业人员,不得盲目操作。
⑷ 不得在试验室储备食品、吃食品、抽烟、使用化装品以及清洗隐形眼镜。不得将家眷、小孩、亲友带进化学试验室。
⑸ 必须戴防护镜,穿工作服,包含不露脚趾满口鞋,长发必须束起。
⑹ 熟悉在紧急情况下逃离路线和紧急疏散方法;清楚灭火器材、安全淋浴间、眼睛冲洗器位置、抢救电话。
⑺ 保持试验室门和走道通畅,最小化存放试验室试剂数量,未经允许禁止储存剧毒药品。
⑻ 试验必须在适当通风柜内进行,密闭和有压力试验必须在特种试验室进行。
⑼ 离开试验室前须洗手,不可穿着试验室服装和戴手套进入清洁场所,如餐厅和休息室等。
⑽ 遇试剂溢出,应该马上去除。如溢出物有剧毒气体挥发,当事人无法处理,必须及时疏散人员并封闭现场,马上汇报室主任和安全部门。
⑾ 保持试验室洁净整齐,无堆积,天天最少清理一次试验台面,通常在下班前或完成某个特定试验后进行。
⑿ 做试验期间禁止脱岗。过夜试验按所“过夜试验管理方法”执行。
⒀ 及时按要求处理废弃化学品,包含化学废弃物、过期化合物、生物废弃物。每七天在指定时间送往指定地点。
⒁ 试验室及禁烟区内禁止吸烟,禁止吸游烟。禁止违章使用明火。
⒂ 工作时间之外,任何人都不允许在试验室单独操作大型仪器和危险化学品,或单独处于具潜在危险场所。
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学生分组
1 学生分为6组,每组3个人,每组选一个小组长
2 安排值日生
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分小组配置相关溶液
1 配制10XPBS及1XPBS
10×Phosphate Buffered Solution(PBS)(pH ) :
Reagent
Weight
Final concentration
NaCl MW=
g
M
KCl MW=
g
27 mM
Na2HPO4·12H2O MW=
g
100 mM
KH2PO4 MW=
g
18 mM
H2O
Up to 1000 ml
注:1000 ml溶液用约1ml 10 M NaOH调整pH值至 。因为试验室所用蒸馏水、三蒸水和去离子水本底pH值有一定差异,加之NaOH可能因为放置时间而产生pH值改变,故实际用量需依据情况调整。
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2 配制1N HCl,1N NaOH
3 配制组织固定液:4% PFA
4 配制热修复液:Tris-EDTA
5 配制梯度酒精:75%, 85%,95%
6 酒精:二甲苯=1:1
7 石蜡:二甲苯=1:1
分小组配置相关溶液
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动物致死法
动物处死方法: 乙醚或4%戊巴比妥静注
5. 二氧化碳窒息法
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病人死亡后,普通要在数小时后才能做尸检,所以,及时取材,尽早固定是开展IHC 检测关键。
尸检组织取材
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抗原在组织中分布常不均一,取材时应考虑:主要病灶,病灶与正常组织交界处,远离病灶正常组织。
组织大小:长1cm×宽1cm×~。
手术切除标本取材
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,尤其是开展分子生物学工作。 动物组织取材要求心脏还在跳动时取材。
刀和剪要快,刀要足够长。
~,大小可依据需要而定
4. 组织取材位置 要视研究目标,观察部位而定
标准上,应尽快取材,但比较大手术标本如胃、肺、肠等器官,最好先固定后取材。
组织取材注意事项
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