文档介绍：双孢菇菌糠生产微生物菌肥技术研究
摘要:
关键词:————晨曦
(研究现状:)————纪娇
1 材料与方法
实验材料 ————白冰
土壤
试验试剂
斜面培养基(g/L):蛋白胨5, 葡萄糖20,磷酸二氢钾2,硫酸镁1,琼脂粉20;
液体培养基(g/L):蛋白胨5, 葡萄糖20,磷酸二氢钾2,硫酸镁1;
从土壤中分离微生物及其鉴定的方法—白冰
---迟小明
试验采用双层平板、经两次培养来测定,
具体做法:
首先,将7种菌分别涂布于固体葡萄糖蛋白胨平板培养皿上( 己经验证所有7 株菌都能在共用葡萄糖蛋白胨平板培养皿中很好生长).每个菌种需涂布7个培养皿。37 ℃培养24h。
然后,取7种菌的培养液,适当稀释,取1ml加入到冷却至45 一50 ℃的葡萄糖蛋白胨斜面培养基中摇匀,然后立即倒在涂布菌落已长成的平板上,制得双层平板。将倒好的双层平板37 ℃培养24h,观察结果。如果相应的两株菌之间有拮抗现象,则上层平板中应该有透明圈;如果相应的两株菌之间没有拮抗现象,则上层平板中不会出现透明圈。
---晨曦
将少量菌种接种到一定体积的、适合的新鲜培养基中,在适宜的条件下进行培养,定时测定培养液中的菌量,以菌量的对数作纵坐标,生长时间作横坐标,绘制的曲线叫生长曲线。它反映了单细胞微生物在一定环境条件下于液体培养时所表现出的群体生长规律。依据其生长速率的不同,一般可把生长曲线分为延缓期、对数期、稳定期和衰亡期。这四个时期的长短因菌种的遗传性、接种量和培养条件的不同而有所改变。因此通过测定微生物的生长曲线,可了解各菌的生长规律,对于科研和生产都具有重要的指导意义。测定微生物的数量有多种不同的方法,可根据要求和实验室条件选用。本实验采用比浊法测定,由于菌悬液的浓度与光密度(OD值)成正比,因此可利用分光光度计测定菌悬液的光密度来推知菌液的浓度,并将所测的OD值与其对应的培养时间作图,即可绘出该菌在一定条件下的生长曲线,此法快捷、简便。
3 材料
仪器和器具 721分光光度计,比色杯,恒温摇床,无菌吸管,试管,三角瓶。
4 流程种子液→标记→接种→培养→测定
5 方法
,以无菌操作挑取1环菌苔,接入肉膏蛋白胨培养液中(液体培养基接种法),静止培养24h作种子培养液。
,分别编号为0、、3、4、6、8、10、12、14、16、20h。
,于37℃下振荡培养。然后分别按对应时间将三角瓶取出,立即放冰箱中贮存,待培养结束时一同测定OD值。
(空白对照)倾倒入比色杯中,选用600nm波长分光光度计上调节零点,作为空白对照,并对不同时间培养液从0h起依次进行测定,对浓度大的菌悬液用未接种的牛肉膏蛋白胨液体培养基适当稀释后测定,.~,经稀释后测得的OD值要乘以稀释倍数,才是培养液实际的OD值。
6 结果