文档介绍：蛋白质组学研究技术服务
张立岩
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biozhangliyan@
Main Content
蛋白质组学研究
蛋白质N-末端测序
质谱分析
1. 20世纪中后期,生命科学研究进入了分子生物学时代。
2. 随着人类基因组全序列测定,生命科学跨入了后基因组时代。
mRNA的表达情况不能直接反应蛋白质的表达水平
蛋白质动态修饰、加工、转运定位、结构形成、代谢等,
均无法从基因组水平上的研究获知
蛋白质构象病更难于只靠DNA序列来解释
3. 蛋白质才能动态反映生物系统所处的状态。
20世纪90年代中期,国际上萌发了蛋白质组学。
产生背景
蛋白质组学概念
是一个基因组所表达的所有蛋白质(动态)
基因组学(结构)
蛋白质组学(功能)
澳大利亚Macquarie大学的Wasinger和Williams等于1995年在意大利的锡耶纳(Siena)召开的双向电泳会议上首次提出
转录、表达、加工、修饰、运输(时空)
蛋白质组学(proteomics):
整体性:分析细胞内全部蛋白质组成成份
动态性:表达水平与修饰状态
(不同细胞、组织、生理条件和发育阶段)
系统性:蛋白质之间的相互作用

揭示生物学行为(疾病过程和药物效应)
基因表达调控机制
蛋白质组学内容
表达研究: SAGE和基因芯片. 拼接和修饰(mRNA)
功能研究: 1/3序列功能未知
修饰研究:磷酸化和糖基化等翻译后修饰(信号诱导)
定位和区域化:亚细胞定位提供蛋白调控新机制
蛋白质间相互作用:表达调控
蛋白质组学应用领域
1: 蛋白质分离和纯化
1DE
SDS-PAGE电泳(分子量)
2DE
等电聚焦电泳(等电点)
SDS-PAGE电泳(分子量)
激光捕获显微切割(LMD)
技术平台
考马斯亮兰染色
银染
荧光染色
从组织切片中将不同类型的细胞精确分离
蛋白质分离
1-DE:
分子量
2-DE:
等电点
分子量
等电点(pI)
IPG胶条
2 DE
分子量 SDS-PAGE
2 DE