文档介绍：掌握:
基因芯片、蛋白质芯片、基因文库的概念;
※酵母双杂交技术、
※标签蛋白沉淀原理及应用;
△染色质免疫沉淀技术的基本原理及应用。
了解:
基因芯片和蛋白质芯片的基本原理、EMSA基本原理。
标签融合蛋白结合实验是一个基于亲和色谱原理的、分析蛋白质体外直接相互作用的方法。
(一)标签蛋白沉淀
标签融合蛋白结合实验主要用于证明两种蛋白分子是否存在直接物理结合、分析两种分子结合的具体结构部位及筛选细胞内与融合蛋白相结合的未知分子。
标签融合蛋白沉淀实验流程示意图
GST:谷胱甘肽S-转移酶
酵母转录激活因子GAL4的结构
DNA结合域(binding domain, BD)
转录激活域(activation domain, AD)
GAL4
(二)酵母双杂交技术的基本原理和用途
(二)酵母双杂交技术的基本原理和用途
猎物
DNA bination and
binant DNA technology
第二十一章
DNA重组和重组DNA技术
掌握:
△同源重组、接合、转化、转导的基本概念;
重组DNA技术(基因工程,DNA克隆)
※ II型限制性核酸内切酶;
※载体
※基因工程操作过程:分、选、接、转、筛;
真核表达体系常用的受体细胞和转染方法;
△原核表达体系的缺点。
了解:
特异位点的重组;转座重组;基因工程技术在医学中的应用。
DNA重组(DNA bination)是指不同DNA分子断裂和连接而产生DNA片段的交换并重新组合形成新DNA分子的过程。