文档介绍：河北北方学院
毕业论文开题报告
组方加减三黄汤对鼠生化指标的影响
姓名:赵维姿
院系:动物科技学院动物医学系
专业:动植物检疫
年级:2007级动检本科班
学号:20071040130
指导教师:尹秀玲
一立题依据
大肠埃希氏菌(E. coli)通常称为大肠杆菌,一些特殊血清型的大肠杆菌对人和动物有病原性,常引起严重腹泻和败血症。
该病还可能与其它疾病并发或继发于其它疾病,这给养殖户临诊带来了困难,从而造成临床上用药混乱,极易产生耐药性,给养殖户造成很大经济损失[1-2]。大肠杆菌( )之所以产生多重耐药性,可能与耐药性质粒[3-4] 、菌体细胞膜通透性、菌体上存在的主动外排系统有关[5] 。在研究中发现菌体细胞膜通透性的改变不仅能引起低程度的耐药,而且与细胞膜上的主动外排系统有关,菌体细胞膜通透性的改变与主动外排系
统的超量表达共同作用可引起细菌对多种抗菌药的存在可使多重耐药水平提高数倍。中药在临床治疗方面具有独特作用,据报道,中药的活性成分能够明显抑制耐药大肠杆菌的外输系统,对R质粒具有明显的消除作用[6-8]。通过对传统中药三黄汤加减配成不同组方,观察体外抑菌效果,筛选出能够抑制大肠杆菌药物耐药性的抑制剂,来消除其多重耐药。
本实验先通过在体外对人源大肠杆菌进行临床分离细菌鉴定、分离培养、血清型鉴定和耐药性检测,然后再将分离鉴定的菌株回归到动物体内,对鼠的免疫力进行检测,获取有效组方应用于临床,可为该病今后防治提供一定依据。
二、研究内容
通过制备组方三黄汤,培养大肠杆菌,对鼠进行攻毒与治疗,测定其免疫指数,检测生化指标,最后来判断组方的疗效。本实验主要研究组方加减三黄汤,来消除或抑制大肠杆菌的耐药性。
三、研究方法与技术路线
中药组方:
(1)加减三黄汤(Modified Three Yellow SoupⅠ, MTYSⅠ)黄芩12g、黄连12g、穿心莲9g、苦参9g、大青叶15g、厚朴9g、秦皮6g、金银花15g、木香6g、甘草9g、黄芪9g、黄柏12g、茯苓9g。
(2)加减黄芩汤(Modified Scutellariae soup,MSS):黄芩12g、黄连12g、黄柏9g、芍药9g、甘草6g、赤芍15g。
2 将70只小鼠分为
健康组﹙A组﹚
攻毒2751组﹙B组﹚
攻毒2952组﹙C组﹚
攻毒2751+MSS组﹙D组﹚
攻毒2952+MSS组﹙E组﹚
攻毒2751+MTYS组﹙F组﹚
攻毒2952+MTYS组﹙G组)
将大肠杆菌2751(O148+O1)、 2952(O142+O26+O13)感染小鼠。,,连用7天,常规饲喂,检测鼠体免疫力。
3 检测指标
测定相应体重变化、肝肾功能的血常规检验指标来判定抑制耐药程度,获取有效组方。
分离肝、脾、法氏囊测定其免疫指数
分离血清、对小鼠进行药物作用前后的感染试验,检测生化指标,谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、γ-谷氨酰转移酶(GGT)、碱磷酶(ALP)采用速率法;尿素氮(BUN)、尿酸(UA)采用酶法; IgG、IgA、IgM利用免疫比浊方法,在日立7150全自动生化分析仪上进行,试剂均购于上海长征公司。
技术路线
两种大肠杆菌的培养
观察结果及临床症状
免疫指数的测定
判定中药组方效果
两种三黄汤的制备
生化指标的检测
动物分组、攻毒及治疗