文档介绍：第五章
酶学分析技术
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酶(enzyme)的本质:
高度特异性、高度不稳定性,高效性、可调节性
酶的应用:
由活细胞产生的能高效催化特异生化反应的蛋白质,属于生物催化剂
酶的特点:
酶活性的检测、代谢物的酶学分析和同工酶及亚型测定用于临
床诊断和疗效判断
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主要内容:
酶活性测定的基本知识
酶活性的测定
代谢物的酶法检测
同工酶测定
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掌握酶活性单位的表示方法与计算、酶活性测定的定时法与连续监测法、代谢物的酶法测定。
熟悉酶促反应进程、酶促反应动力学、酶活性测定的直接法与间接法、酶活性测定的影响因素。
了解同工酶产生的机理与测定方法、酶活性单位的校准、工具酶的应用。
教学要求:
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一、酶活性
定义:酶活性(enzyme activity)也称为酶活力,指酶促反应速率,即规定条件下在单位时间内产物的生成量或底物的减少量。
表示方法:
或
式中v:反应速率,[P ]:产物浓度,t:时间,[S]:底物浓度。
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二、酶活性单位与酶活性浓度
(一)酶活性单位
定义:表示酶的相对含量,指在一定条件下,单位时间内
生成一定量的产物或消耗一定量的底物所催化的酶量。
表示方法:
惯用单位(一定的反应量/一定的反应时间)
国际单位IU(µmol/min)
Katal单位(mol/s)
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:
20世纪60年代以前根据酶活性测定方法建立者的姓氏命名的单位
ALP的金氏单位(King)
氨基移转酶的卡门氏单位(Karmen)
特点:各单位对温度、时间、物质量的定义不同,导致各测定值、参考范围相差很大,彼此间无法比较,现在临床应用较少。
卡门氏单位:℃,340nm,,, 10-4μmol NADH为一个卡门氏单位
举例:
金氏单位:100ml血清ALP在37℃与底物作用15min,产生1mg酚。
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(µmol/min)
定义:在规定条件下(25℃及其他最适条件),每min催化1µmol
底物转变为产物的酶量,为1IU或1U,1IU=1µmol/min。
,2001年
37℃
定义:1Katal是在规定条件下,每秒钟催化1mol底物转变为产物的
酶量。1Katal=1mol/s。
IU与Katal单位的关系:1katal = 60×106IU,1IU =
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