文档介绍：植物组织培养:离体条件下利用人工培养条件在无菌情况下培养、生长、发育再生出完整植株的过程。外植体:由活体植物体上提取下来的,接种在培养基上的无菌细胞、组织、器官等。植物细胞的全能性:植物细胞具有该植物体全部遗传的可能性,在一定条件下具有发育成完整植物体的潜在能力。脱分化:将来自已分化组织的已停止分裂的细胞从植物体部分的抑制性影响下解脱出来,恢复细胞的分裂活性。再分化经脱分化的组织或细胞在一定的培养条件下可有转变为各种不同细胞类型的能力。
设备与培养条件
实验室组成:化学实验室、洗涤菌室、无菌操作室、培养室、细胞学实验室。 1化学实验室:完成所使用的各种药品的贮备、称量、溶解、配制、培养基分装等。主要设备: 药品柜、防尘橱(放置培养容器)、冰箱、天平、蒸馏水器、酸度计及常用的培养基配制用玻璃仪器. 2 洗涤、灭菌室:完成各种器具的洗涤、干燥、保存、培养基的灭菌等。主要设备:水池、操作台、高压灭菌锅、干燥灭菌器(如烘箱)等。3无菌操作室(接种室):主要用于植物材料的消毒、接种、培养物的转移、试管苗的继代、原生质体的制备以及一切需要进行无菌操作的技术程序。主要设备:紫外光源、超净工作台、消毒器、酒精灯、接种器械(接种镊子、剪刀、解剖刀、接种针)等。4培养室:培养室是将接种的材料进行培养生长的场所。主要设备:培养架(控温控光控湿)、摇床、培养箱、紫外光源等。5细胞学实验室:用于对培养物的观察分析与培养物的计数等。主要设备:双筒实体显微镜、显微镜、倒置显微镜等。6其他小型仪器设备:分注器、血球计数器、移液枪、过滤灭菌器、电炉等加热器具、磁力搅拌器、低速台式离心机等。
培养基及其制备
培养基的成分主要可以分水、无机盐、有机物、天然复合物、培养体的支持材料等五大类。常用的培养基及特点如下:
(1)MS培养基特点是无机盐和离子浓度较高,为较稳定的平衡溶液。(2)B5培养基其主要特点是含有较低的铵,这可能对不少培养物的生长有抑制作用。(3)White培养基其特点是无机机盐数量较低,适于生根培养。(4)N6培养基其特点是成分较简单,KNO3和(NH4)2SO4含量高。(5)KM—8P培养基其特点是有机成分较复杂,它包括了所有的单糖和维生素,广泛用于原生质融合的培养。水是植物原生质体的组成成分,也是一切代谢过程的介质和溶媒。1无机营养--①大量元素,。其作用是:(1)N 是蛋白质、酶、叶绿素、维生素、核酸、磷脂、生物碱等的组成成分,是生命不可缺少的物质。(2)P 是磷脂的主要成分。在植物组织培养过程中,向培养基内添加磷,不仅增加养分、提供能量,而且也促进对N的吸收,增加蛋白质在植物体中的积累。(3)K 对碳水化合物合成、转移、以及氮素代谢等有密切关系。K增加时,蛋白质合成增加,维管束、纤维组织发达,对胚的分化有促进作用。但(4)Mg、S和Ca、Mg 是叶绿素的组成成分,又是激酶的活化剂;S是含S氨基酸和蛋白质的组成成分。Ca是构成细胞壁的一种成分,Ca对细胞分裂、保护质膜不受破坏有显著作用,铁是一些氧化酶、细胞色素氧化酶、过氧化氢酶等的组成成分。同时,它又是叶绿素形成的必要条件。培养基中的铁对胚的形成、芽的分化和幼苗转绿有促进作用。也是植物组织培养中不可缺少的元素,缺少这些物质会导致生长、发育异常现象。②微量元素,作为酶的辅助