文档介绍：缩略语表
缩略词 英文全称 中文全称
AFP Alpha Fetoprotein 甲胎蛋白
COX-2 Cyclooxygenase-2 环氧合酶-2
DAPT N-[N-(3,5-Difluorophenacetyl)-L-alanyl]- (S)-phenylglycine t-butyl ester
N-[N-(3,5-双***酚内氨酰)]-S-苯
氨基乙酸 t-丁基酯
DEPC Diethyl Pyroebaronate 焦碳酸二乙酯
DMSO Dimethyl Sulfoxide 二甲亚砜
EDTA etraacetic acid 乙二***四乙酸 ELISA Enzyme Linked Immunosorbent Assay 酶联免疫吸附实验 EMT Epithelial-Mesenchymal Transition 上皮间质转换
ERK Extracellular regulated protein kinase 细胞外调节蛋白激酶
mRNA Messenger Ribonueleie Acid 信使核糖核酸
MMP Matrix Metalloproteinase 基质金属蛋白酶
MTT 3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-dipheny ltetrazolium bromide
3-(4,5- 二***噻唑-2)-2,5- 二苯
基四氮唑溴盐
NF-κB Nuclear Factor-κB 核因子-κB
NICD Notch Intracellular Domain Notch 胞内段
PBS Phosphate buffered saline 磷酸盐缓冲液
PGE2 Prostaglandin E2 前列腺素 E2
siRNA Small interfering RNA 小干扰 RNA VEGF Vascular Endothelial Growth Factor 血管内皮成长因子
Notch 信号通路参与肝癌细胞侵袭迁移的机制研究
博士研究生:周 亮
导 师:窦科峰 教 授辅导教师:王德盛 副教授
第四军医大学西京医院肝胆胰脾外科,西安 710032
资助基金项目:国家自然科学基金重点项目(No:81030010)
中文摘要
关键词:肝细胞肝癌、Notch 信号通路、侵袭、迁移原发性肝细胞肝癌(hepatocelluar carcinoma,HCC)是常见的致死性恶性肿瘤之
一,虽然各种治疗方法不断改进,但是该疾病的死亡率仍高居不下,究其原因主要是肝癌的复发及肝内外转移。所以针对肝癌转移机制的研究也成为目前的热点之一, 也为肝癌的治疗提供了新的思路。肝癌细胞转移,最主要就是侵袭和迁移的过程,
主要包括:肝癌细胞活动性增强,细胞之间粘附性降低,肝癌细胞从原发灶脱离后穿过细胞外基质及血管壁的基底膜,进入脉管循环,在这个过程中肝癌细胞还能促进血管的形成。而在这个过程中许多分子参与其中,如 Fascin、E-cadherin、MMP-2、 MMP-9 及 VEGF。Notch 信号通路是一种经典的信号通路,该通路的家族成员在结构上具有高度的保守性。一般传统上认为 Notch 信号通路主要参与了生物个体的发育及组织的再生。随着对 Notch 信号通路的研究不断深入,发现该通路不仅参与了生物个体的发育过程,还参与肿瘤的不同发生、发展过程。目前国内外有关 Notch 信号通路在肝癌中的作用机制报道较少。尤其是关于其在肝癌转移中的作用及机制尚不清楚。
本实验采用不同的肝癌细胞系,通过 Notch 信号通路的阻断剂来处理细胞,从
细胞骨架改变、细胞迁移、细胞侵袭三个方面探讨了 Notch 信号通路参与肝癌细胞侵袭迁移的机制。结果提示 Notch 信号通路能够在上述三个方面,通过调控不同的分子发挥作用。本研究补充了 Notch 信号通路在肝癌中的作用机制,为阐明肝癌的转移机制奠定基础。
实验一:Notch 信号通路在肝癌细胞中的状态及阻断 Notch 信号通路对肝癌细胞侵袭迁移的影响。
目的:探讨 Notch 信号通路在肝癌细胞中的状态及阻断 Notch 信号通路对肝癌细胞侵袭迁移的影响。方法:Transwell 小室检测细胞的侵袭和迁移能力;RT-PCR 的方法检测了 Hes1、Hes5、Hey1 的 mRNA 表达;Western Blot 的方法检测了 N1ICD 的蛋白表达;MTT 和细胞计数的方法检测了细胞的增殖;DAPT 阻断 Notch 信号通路。结果:Hes1、Hes5、Hey1 及 N1ICD 在肝癌细胞中高表达,与细胞的侵袭迁移能力呈正相关;1μmol/L 和 5μmol/L 浓度的 DAPT 能够有效抑制 Notc