文档介绍：系统性红斑狼疮患者外周血T淋巴细胞亚群的变化
The Change of Peripheral Blood T Lymphocyte Subsets in Patients ic Lupus Erythematosus
Abstract: Objective To study the change of T lymhocyte subsets ic lupus erythematosus. Methods 30 patients ic lupus erythematosus and 20 cases of healthy subjects phocyte subsets eter. Results Decrease in CD4+ cells and phocyte isplay an important role in the development of SLE.
Key ic lupus erythematosus; T lymphocyte; Floety
系统性红斑狼疮(SLE)是一种自身免疫性疾病,存在免疫功能的紊乱,但其发病机制及机体内免疫调节细胞的具体变化尚未完全明确。本研究采用特异性荧光抗体标记流式细胞术,探讨SLE患者在疾病的不同阶段外周血CD3+、CD4+、CD8+淋巴细胞的变化,为阐述SLE患者存在的免疫功能紊乱、揭示SLE的发病机制提供实验依据。
1 资料与方法
临床资料
SLE患者30例,其中女29例,男1例,年龄17岁~54岁,,所有病例均符合1982年美国风湿病学会(ARA)修订的SLE诊断标准[1]。采用1992年欧洲SLE活动性评分标准判断SLE的病情活动性[2]。其中活动期SLE 18例(活动期患者未用糖皮质激素),非活动期SLE 12例,正常对照组为20例健康志愿者。
主要试剂和仪器
双色标记单抗CD3+、CD4+分别与FITC、PE荧光素结合;含beads的TrueCount管;CaliBRITEbeads;FACS溶血素(均为美国BD公司产品)。FACS Calibur流式细胞仪(美国BD公司)。
实验方法
标本处理:抽患者外周血2 ml,用肝素钠抗凝管保存,6 h内分析;向TrueCount管中分别加入20 μl抗体和50 μl的抗凝全血,振荡混匀3 s,避光放置15 min;加入FACS(1X)溶血素2 ml,充分混匀,室温避光10 min;1 000 rpm/min离心5 min,弃上清;加入2 ml PBS洗一次;800 rpm/min离心5 min,弃上清;流式细胞仪上机检测。数据获取与分析使用CaliBRITE标准微球、FACSp软件调节FACS Calibur流式细胞仪PMT电压、荧光补偿、灵敏度,应用SimulSET分析软件对处理好的标本进行CD3+、CD4+、CD8+相对计数。
统计学分析
采用SPSS ,所有数据以均数标±准差(±s)表示,组间比较采用t检验进行数据分析。
2 结果
SLE患者外周血T细胞亚群检测结果见表1,SLE活动期患者与正常组比较CD4+细胞数明显降低(P<);CD4+/CD8+比值降低(P<)。SLE活动期患者与正