文档介绍：猪瘟的实验室抗原检测方法
猪瘟的实验室抗原检测方法
李岩
(黑龙江省青冈县畜牧兽医局,黑龙江青冈151600)
随着对猪瘟(CSF)研究的不断深
法,下面给大家详细介绍.
1病原分离和回归试验
变典型的可疑组织,包括血液或脏器,
经研磨,超声裂解,差速离心提取病
,另一方面再
,
敏感性强,最具诊断价值,但耗时,耗
财.
应采集扁桃体,脾,肾和回肠末
(CSFV)感染
后最先能检测病毒抗原阳性的组织.
腐剂,置低温环境(冰盒巾)巾,尽快
免疫荧光法和接种细胞培养分离病毒的
病料要新鲜,用于病毒分离的病料还应
过滤除菌.
用猪肾,睾丸的原代,次代或传代
,离心,过滤除
.
通常用荧光抗体法可测m细胞培养中盖
城疫病毒强化试验检测CSFV的存在.
猪是CSFV唯一的易感动物,用其
作为实验动物诊断本病是最可靠的方
(10~20)分为
组,每组3~,一组接种猪瘟
疫苗,另一组皮下注射猪瘟抗血清
(1mL/kg体重).1周后组同时接种
被检病料(血毒或病料乳剂1mL/头),
继续饲养2~
变化,
靠,但此过程需要严格的隔离条件,且
耗时较长,仅在特别需要(如重要疫情)
时及其它诊断方法很难确诊时使用.
2兔体交叉免疫试验
已知猪瘟兔化弱毒可使家兔产生定
型热反应,猪瘟强毒则不能,但能使兔
这一现象,将病料研磨后用生理盐水作
l:1O稀释,
康家兔(体重2k左右)作肌肉注射,
每只注射被检病料组织悬液上清1mL;
天测家兔体温3~,对所有
家兔静脉接种100个兔体半数热反应剂
量(10稀释的C系兔化弱毒).继续
测温5~7天,
2/3出现定型热或轻型热,试验成立,
并根据体温反应判定结果(见表1).
用这种方法能检出待测病料中可能存在
的CSFV强毒和兔化弱毒株,特异性
长,成本高.
3琼脂扩散试验
猪脾,淋巴结做抗原(脾脏较好).该
法是将琼脂糖按l%
硼酸盐缓冲液中煮沸溶解,倒人平皿
中,冷却后置4~,
最常用的是在凝胶板上作成7孔图形
(中央打1孔,周围打6孔).检测抗原
,
周围孔加已知抗原,阴性抗原和待检样
品,置湿盒内于37