文档介绍：亮氨酸氨基肽酶检测
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亮氨酸氨基肽酶
LAP是一种蛋白酶,LAP广泛分布于人体各组织,以肝、胆、肾、小肠以及子宫肌层内含量最多。肝内外胆淤时,LAP活力显著增高,尤其在恶性胆淤时,其活力随病情进展而持续增高。对肝道梗阻及胰腺癌的诊断有价值。
【检测方法】
一般采用L-Leucine-p-nitroanilide作为底物通过LAP水解,通过检测P-nitroaniline来测定LAP的活性,此方法在六十年代即为推荐方法。
【原理】
L-亮氨酸-p-硝基苯***被标本中的LAP分解,游离出L-亮氨酸-p-硝基***,在405nm处检测吸光度变化率,测得LAP活性值。
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亮氨酸氨基肽酶
【试剂】
Tris缓冲液 100 mmol/L
L-亮氨酸-p-硝基苯*** 2mmol/L
【操作参数】
主波长 405nm
副波长 505nm
温度 37℃
分析类型速率法
样本/试剂 10/300
延迟时间/检测时间 3/2
在检测时间内读取两次不同时间的吸光度用其差值进行计算。
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亮氨酸氨基肽酶
【计算因子说明】
ΔA/min----每分钟吸光度变化率 e--------- 摩尔消光系数
Vt-----------反应液总体积(ml) Vs------- 标本体积(ml)
1000--------变化因数 d--------- 1比色杯光径(cm)
F*-------- 3100 理论因数
【正常值】
血清LAP活性单位:20~60U/L
【计算】
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亮氨酸氨基肽酶
【临床意义】
LAP是一种蛋白酶,肝内含量很丰富。肝内外胆淤时,LAP活力显著增高,尤其在恶性胆淤时,其活力随病情进展而持续增高。试剂对肝道梗阻及胰腺癌的诊断有价值。肝坏疽、肝肿瘤