文档介绍：复旦大学
博士学位论文
大鼠肾小球系膜细胞TGF-β1/Smad信号转导通路的实验研究
姓名:杨琛
申请学位级别:博士
专业:病理学
指导教师:郭慕依
20040420
——┒思っ细胞外基质徒涸Ⅳ.Ⅳ/.,猯猼猯一
大鼠肾小球系膜细胞/信号转导通路的实验研究中文摘要前言肾小球硬化是临床多种鲂∏蚣膊。缟鲂∏蛏鲅住肾病、糖尿病肾病及狼疮性肾炎等引起患者慢性肾功能衰竭的重要病理基础,其主要病理特征是肾小球结构的毁损以及肾小球内囊斐;郏鳨合成和降解失衡被认为是导致肾小球硬化的重要发生机制。因此,近年来的研究热点已逐渐集中到坏牡骺鼗疲约坝肷鲂∏蛴不⑸⒎⒄沟南嗷ス叵瞪稀阐明。蛋白家族的发现无疑为细胞内信号转导机制的进一步阐明介导分子。在哺乳动物细胞中,其家族可分为罄啵阂皇鞘芴寮せ頢榉帧⒒式鹗艚到饷讣捌湟种萍料低潮泶锏挠跋欤簧钊中的作用,并为开展对肾小球疾病动物模型的基因治疗提供理论和实验依据。瓸且桓龆喙δ芟赴蜃樱谙赴鲋场⒎⒂⒎只⒌蛲觥⒓懊庖调节过程中都发挥着重要作用。瓺彩荅代谢的一个重要调节因子,但其促进肾小球病变发生发展或硬化的发生机制仍在深入研究之中,尤其是瓸诘鹘贓合成和降解过程中所涉及的细胞内信号转导机制尚未完全提供了重要依据。最新研究表明,,苏氨酸激酶受体结合后,将其信号从细胞膜传递到细胞核过程中极其重要的细胞内信号⊿、、蚐:二是共同通路甋,即喝且种菩許⊿和本课题拟采用细胞基因转染技术,观察疭藕抛5纪范蕴逋馀探讨与信号转导系统在狟榈嫉腟基因转录过程中存在的串话.=徊讲鱐—疭藕磐吩谏鲂∏蛴不⑸养的大鼠肾
第一部分基因转染对大鼠肾坏挠跋目的探讨碨、。方法采用脂质体介导法,分别将和蛩彩弊H咎逋馀、明胶酶谱法或反式明胶酶谱法,观察转基因赥结果转染基因的琓促进铣傻淖饔檬艿矫飨促进,表现为略有升高,经作用后有明显升高,蛋白表达分别增加倍和甇倍,酶小结转染和蚝螅纱俳鳷訫一鞍妆泶锖兔富钚缘淖饔檬艿矫飨源进,蛋白表达和酶活性均无明显变化。第二部分蜃H径源笫笊鯩方法采用脂质体介导法,将蛩彩弊H咎逋馀嘌腗,分别养的⒂妹庖哂ü狻蚖法检测其转染成功与否;。,,ⅱ,作用后升高更为明显,蛋白表达增强倍,,而蛋白表达则无显著变化:ⅱ艉ⅱ中文摘要
、明胶酶谱法或反式明胶酶谱法,观察在作用下,转基因结果转染虻腗,促进其胶原蛋白合成的作用受到显著抑制,表现为ⅱ.;转染显抑制,ⅱ:采用半定量检测结果在瓸饔孟拢谠础基因转录水平明显升高:转染基因后,榈嫉哪谠葱許基因转录作用明显增强经作用后,疭转录因子复合物与昙堑腟探针的结小结纱俳谠葱許基因转录,云渚哂猩系髯饔谩ⅱ艉蚆·疶蛋白表达和酶活性的改变。基因的琓上调、.鞍追置诤兔富钚缘淖饔镁艿矫录过程中的共同调节作用。訲介导的内源性蜃B嫉挠跋欤翰捎肊鄄霺/B家蜃痈春衔镆约白B家蜃覣許基因的转录调控作用。结果显示,合活性明显增强:而作用前后,转录因子·隓标记的一秸的结合活性无明显变化。疭转录因子复合物可能与蚱舳由嫌位虻骺匦蛄蠸的结合,。中文摘受
甌/信号转导通路可能通过直接蒯激铣蒃和改变用,通过直接抑制胶原的合成和促进其降解,进而抑制幕郏赥介导的蜃B脊讨校琒/B家蜃痈春衔锞关键词结论其/.谋泶锛懊富钚远扇派鲂∏駿代谢过程,从而在肾小球硬化发生中发挥重要作用。R种菩許碨在藕抛5纪分蟹⒒痈悍蠢〉鹘谧可能对肾小球硬化具有治疗作用。有正相调节作用;而转录因