文档介绍：临床兽医学专业毕业论文[精品论文] 鹌鹑蛋清溶菌酶的分离纯化及其性质研究
关键词:鹌鹑蛋清溶菌酶分离纯化体外抗茵活性
摘要:为了更进一步了解蛋清溶菌酶的性质,本试验利用CM Sepharose FF阳离子交换柱层析和Sephadex G-75凝胶层析对鹌鹑蛋清溶菌酶进行分离纯化,结果表明,分离纯化效果比较理想,峰之间区分非常明显,纯化过程中阳离子交换柱层析纯化效果最为明显,,去除了大部分杂蛋白,,,活力回收率为38%。采用聚丙烯酰***凝胶电泳、SDS-聚丙烯酰***凝胶电泳及温度、pH值、常见金属离子对鹌鹑蛋清溶菌酶进行鉴定和性质研究,电泳结果显示均见单一务带,表明该溶菌酶已达到电泳纯,其分子量约为16000Da。该酶在10℃~20℃其活性较低,30℃活性最高,40℃~60℃活性下降,这表明该酶最适温度为30℃左右。在pH6~7近中性环境中,鹌鹑蛋清溶菌酶活性最强,在偏酸性(pH<)和偏碱性(pH>)的环境中,鹌鹑蛋清溶菌酶的活性降低。Zn2+、Cu2+对该酶有激活作用,Mn2+和Ag+对该酶有抑制作用,Ba2+、Ca2+、Fe3+、Na+等对该酶活性没有显著影响。对鹌鹑蛋清溶菌酶进行体外抗菌活性的研究,研究其抑菌谱、最小抑菌浓度,同时应用透射电镜研究其抑菌机制,结果表明,鹌鹑蛋清溶菌酶对革兰氏阳性菌有抑菌的作用,如金黄色葡萄球菌,枯草杆菌抑菌效果显著,对部分革兰氏阴性菌有抑菌作用,如嗜水气单胞菌、鳗弧菌也有不同程度的抑制,对大肠杆菌,耶尔森菌抑菌作用不明显。对金黄色葡萄球菌、枯草杆菌,嗜水气单胞菌,鳗弧菌最小抑菌浓度分别为125,250,500,500μg/mL。透射电镜观察,鹌鹑蛋清溶菌酶可使金黄色葡萄球菌细胞质不均匀,细胞壁变薄,内容物外流而死亡。
正文内容
为了更进一步了解蛋清溶菌酶的性质,本试验利用CM Sepharose FF阳离子交换柱层析和Sephadex G-75凝胶层析对鹌鹑蛋清溶菌酶进行分离纯化,结果表明,分离纯化效果比较理想,峰之间区分非常明显,纯化过程中阳离子交换柱层析纯化效果最为明显,,去除了大部分杂蛋白,,,活力回收率为38%。采用聚丙烯酰***凝胶电泳、SDS-聚丙烯酰***凝胶电泳及温度、pH值、常见金属离子对鹌鹑蛋清溶菌酶进行鉴定和性质研究,电泳结果显示均见单一务带,表明该溶菌酶已达到电泳纯,其分子量约为16000Da。该酶在10℃~20℃其活性较低,30℃活性最高,40℃~60℃活性下降,这表明该酶最适温度为30℃左右。在pH6~7近中性环境中,鹌鹑蛋清溶菌酶活性最强,在偏酸性(pH<)和偏碱性(pH>)的环境中,鹌鹑蛋清溶菌酶的活性降低。Zn2+、Cu2+对该酶有激活作用,Mn2+和Ag+对该酶有抑制作用,Ba2+、Ca2+、Fe3+、Na+等对该酶活性没有显著影响。对鹌鹑蛋清溶菌酶进行体外抗菌活性的研究,研究其抑菌谱、最小抑菌浓度,同时应用透射电镜研究其抑菌机制,结果表明,鹌鹑蛋清溶菌酶对革兰氏阳性菌有抑菌的作用,如金黄色葡萄球菌,枯草杆菌抑菌效果显著,对部分革兰氏阴性菌有抑菌作用,如嗜水气单胞菌、鳗弧菌也有不同程度的抑制,对大肠杆菌,耶尔森菌抑菌作用不明显。对金黄色葡萄球菌、枯草杆菌,嗜水气单胞菌,鳗弧菌最小抑菌浓度分别为125,250,500,500μg/mL。透射电镜观察,鹌鹑蛋清溶菌酶可使金黄色葡萄球菌细胞质不均匀,细胞壁变薄,内容物外流而死亡。
为了更进一步了解蛋清溶菌酶的性质,本试验利用CM Sepharose FF阳离子交换柱层析和Sephadex G-75凝胶层析对鹌鹑蛋清溶菌酶进行分离纯化,结果表明,分离纯化效果比较理想,峰之间区分非常明显,纯化过程中阳离子交换柱层析纯化效果最为明显,,去除了大部分杂蛋白,,,活力回收率为38%。采用聚丙烯酰***凝胶电泳、SDS-聚丙烯酰***凝胶电泳及温度、pH值、常见金属离子对鹌鹑蛋清溶菌酶进行鉴定和性质研究,电泳结果显示均见单一务带,表明该溶菌酶已达到电泳纯,其分子量约为16000Da。该酶在10℃~20℃其活性较低,30℃活性最高,40℃~60℃活性下降,这表明该酶最适温度为30℃左右。在pH6~7近中性环境中,鹌鹑蛋清溶菌酶活性最强,在偏酸性(pH<)和偏碱性(pH>)的环境中,鹌鹑蛋清溶菌酶的活性降低。Zn2+、Cu2+对该酶有激活作用,Mn2+和Ag+对该酶