文档介绍:三干粉培养基配制注意事项
1. 称量,溶解
2. 灭菌
3. 分装
4, 保存
,溶解
按称量数准确称取干粉于洁净容器中.
加蒸馏水或去离子水摇匀,避免干粉粘在容器底部.
加热使其充分溶解,在此过程中注意摇匀,避免局部过热.
!!注意避免吸入粉末,特别是含有毒成份的培养基.
灭菌:采用强烈的理化因素使任何物体内外部的一切微生物永远丧失其生长繁殖能力的措施
常用灭菌方法
1,加热灭菌
2,过滤除菌
3,辐射
4,化学试剂灭菌
加热灭菌和过滤除菌
加热灭菌分两种:干热灭菌,湿热灭菌
A 干热灭菌
B 湿热灭菌中我们常见的方法为加热煮沸和高压灭菌,这主要根据不同培养基的成份决定(是否含有对热敏感的成份).
备注:,时间过长或温度过高,会破坏某些成份.
,应适当水浴或迅速冷却保存.
过滤除菌
A 适用于培养基中不耐高温高压的成份,如大多数抗生素,尿素水,亚碲酸钾溶液等。
B 设备和耗材:过滤器,滤膜(µm),过滤垫
备注:使用前,过滤器要经过121℃/15min灭菌
C 我公司提供商业化的附加试剂产品:使用前无须进行过滤除菌,方便使用
分装量不宜超过容积的2/3, 以免灭菌时外溢。
制备平板(Φ90mm):每块15ml左右,厚度约2mm。
干粉培养基及原材料适宜保存在温度为15-30℃的阴凉干燥的环境中
配制好的培养基密封包装后可保存在2-8℃的冰箱中
其他产品要严格按照产品外包装上的保存条件保存
3常用加热煮沸方式的比较
直接用电炉加热:耗时,含琼脂培养基容易烧糊
隔水煮沸的弊端
A温度不够,达不到灭菌效果
B经隔水煮沸的含琼脂培养基,在水浴的过程中易出现分层现象,这是由目前国产培养基的现状所决定的
为您提供一种快速便捷的方式
第一步:采用微波炉适当加热
第二步:在电炉上继续加热至沸腾
4灭菌效果监测的重要性和常用方法
可能引发的问题
灭菌不彻底
同一灭菌锅内不同位置灭菌条件不均,导致同一批高压的培养基颜色不一致,如BGLB,EE肉汤等
常用监测方法
化学指示卡:使用方便,高压后可立即得知监测结果
生物指示剂:准确性高