文档介绍：艾滋病实验室检测新技术
蒋岩中国CDC性病艾滋病预防控制中心
二十一世纪第二届全国性病暨皮肤病学术研讨会
2004年5月中国南京
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目的方法
监测感染检测抗体检测(EIA/PA/RT)
检测策略
窗口期检测抗原检测,核酸检测
pooling RT-PCR
诊断感染诊断 WB
检测策略
近期感染诊断 STARSH方法
治疗评价 CD4/CD8测定 流氏仪检测
显微镜法
病毒载量测定 NASBA, b-DNA,RT-PCR
耐药性检测基因型,表型
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窗口期检测
抗原检测
核酸检测
Pooling RT-PCR方法
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窗口期的范围
定义依据 时间长度
抗体检测 3-6个月
新的EIA试剂可以缩短至14-21天
抗原检测 1-2周
第四代抗原抗体检测试剂可以
使窗口期比第三代抗体试剂缩
短4-5天
核酸检测 5-11天
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抗原检测
P24试剂盒,第四代EIA试剂(1997年在欧洲正式批
准用于血液筛查)
每一个HIV粒子含有1200个p24抗原分子=
每一个HIV粒子含有2个RNA拷贝,如果病毒载量测
定结果为400拷贝/ml,
= p24抗原/ml,800拷贝/ml,即等于有
== p24抗原/ml
抗原在血清抗体阳转前2-18天既可以检测到
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样本(血清/浆)中的p24抗原包括游离的抗原和病毒粒子中的抗原
EIA测定的抗原浓度(F):病毒RNA拷贝数推算的抗原浓度(A)=:2900
样本号 EIA(Cutoff) EIA(pg/ml) RNA拷贝/ml p24pg/ml F/A
1 1,400
2 3700
3 45 1100 56
4 320 11 80000
5 68 40000
6 22 190000
样本经过预处理,破碎病毒粒子后将有利于p24抗原的检测
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病毒RNA检测
第一次病毒学症高峰时间大约在感染后4-11天
病毒RNA检测方法:NASBA,RT-PCR,b-DNA
在高度怀疑有原发感染时,且经抗体检测之后
抗体检测阴性或不确定,有高危行为史或暴露
史,特别是伴有相应的临床表现时,用核酸检
测进行辅助诊断。
早期诊断应用: 个体检测、血液筛查、性病
门诊病人筛查、PMTCT
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Pooling RT-PCR
由于核酸检测的成本很高,方法费时,不可能作为血液筛查的方法,目前在欧洲用pooled血液的方法进行核酸检测,其敏感性取决于pooped样本大小及检测的预值(用特殊的RT-PCR试剂盒检测,以提高敏感性)。可能低于抗原检测,但在个体献血者核酸检测可能比抗原检测更具成本效益。
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