文档介绍：基因捕获
作者:张梦君班级:10级生物工程班学号:1040903050
摘要:基因捕获技术是目前最具应用前景的基因克隆方法之一。利用该技术建立的随机插入突变的突变体文库,可用于寻找、鉴定和研究大量未知功能和已知功能的活化基因,它是继自然突变、物理突变和化学突变之后发展起来的新的分子生物学方法。本文综述了基因捕获技术的基本原理,研究方法和发展现状及远景。
Abstract:Gene cloning technology is one of the most promising gene cloning method. Using this technology to build the random insertion mutations in mutant libraries, can be used to search, identification and study of large numbers of unknown function and known functional gene activation, it is afterwards natural mutation, physical mutagenesis and chemical mutation developed new methods of molecular biology. In this review,the basic theory,study strategies,the development and future directions of gene-trap mutagenesis are discussed.
关键词:基因克隆; 基因捕获;基因捕获载体;表达筛选
Keywords : Gene cloning;Gene trap;Gene trap vector;Expression screening
基因捕获技术是近些年来迅速发展的一个新兴技术,得到许多科研人员的亲睐。基因捕获技术通过报告载体随机整合到基因组、标签插入位点、产生插入失活突变并揭示基因表达模式及其功能,已成为建立高通量、大规模基因突变模型的一种便利手段。随着多种新型载体及捕获策略的出现,基因捕获技术已被成功应用于克隆诸如特异组织发育相关基因、特殊信号传导途径相关基因等多种研究中,在功能基因组学研究中具有广阔的应用前景。
1 基因功能研究的策略
基因芯片、组织表达谱分析等多种传统的分子遗传学方法对于揭示基因功能及复杂的发育事件具有重要意义,但阐释某一基因功能的直接策略是基于对该基因突变后细胞或动物模型的表型分析。因此,x射线、化学诱变、逆转录病毒转染及转基因技术等多种产生突变的方法相继出现并被应用于基因功能研究。但这些方法都带有不稳定性,如经常影响多个基因或引起染色体重排,或不能提供分子标记来克隆突变基因。在胚胎干细胞(embryonicstem cell,ES)内利用同源重组产生特定基因突变的基因打靶技术,即基因敲除和敲进技术(knock out 0r )是目前被用来研究结构信息明确的基因功能的最重要的手段之一。然而,由于同源重组几率低、动物繁育耗时费力且产生的功能失活突变(无义突变,null mutations)常常与疾病中发现的分子损伤类型不同,因