文档介绍：高中生物新课标实验专题复****br/>考纲要求:理解实验目的、原理、方法和操作步骤,掌握相关的操作技能,并能将这些实验涉及的方法和技能进行综合运用。
补初中实验:认识显微镜的结构,学会使用显微镜
实验目的:认识显微镜的结构,初步掌握使用显微镜的方法。
一、光学显微镜的结构、呈像原理、放大倍数计算方法
结构:
光学部分:目镜、镜筒、物镜、遮光器(有大小光圈)和反光镜(有平面镜和凹面镜)
机械部分:镜座、倾斜关节、镜臂、载物台(上有通光孔、压片夹)、镜头转换器、粗、细准焦螺旋。
注:目镜无旋转螺丝,镜头越长,放大倍数越小;物镜有旋转螺丝,镜头越长,放大倍数越大。
呈像原理:映入眼球内的是倒立放大的虚像。(物镜质量的优劣直接影响成像的清晰程度)
放大倍数:目镜和物镜二者放大倍数的乘积)
注:显微镜放大倍数是指直径倍数,即长度和宽度,而不是面积。
二、显微镜的使用:置镜(装镜头)→对光→置片→调焦→观察
。显微镜放置在桌前略偏左,距桌缘8—10cm处,装好物镜和目镜(目镜5× 物镜10×)
。转动转换器,使低倍镜对准通光孔,选取较大光圈对准通光孔。左眼注视目镜,同时把反光镜转向光源,直至视野光亮均匀适度。调节视野亮度只可用遮光器和反光镜,光线过强,改用较小光圈或用平面反光镜;光线过弱,改用较大光圈或用凹面反光镜。选低倍镜→选较大的光圈→选反光镜(左眼观察)
。将切片或装片放在载物台上,标本正对通光孔中心。转动粗准焦螺旋(顺时针),俯首侧视镜筒慢慢下降,直到物镜接近切片(),左眼观察目镜,(反时针)旋转粗准焦螺旋,使镜筒慢慢上升,看到物像时轻微来回旋转细准焦,直到物像清晰。(找不到物像时,可重复一次或移动装片使标本移至通光孔中心)。.观察时两眼都要睁开,便于左眼观察,右眼看着画图。侧面观察降镜筒→左眼观察找物像→细准焦螺旋调清晰
。找到物像后,把要观察的物像移到视野中央,把低倍镜移走,换上高倍镜,只准用细准焦螺旋和反光镜把视野调整清晰,直到物像清楚为止。
顺序:移装片→转动镜头转换器→调反光镜或光圈→调细准焦螺旋
注:换高倍物镜时只能移动转换器,换镜后,只准调节细准焦和反光镜(或光圈)。
问1:低倍镜换为高倍镜后,若看不到或看不清原来的像,可能原因?(ABC)
A、物像不在视野中 B、焦距不在同一平面 C、载玻片放反,盖玻片在下面 D、未换目镜
问2:放大倍数与视野的关系:
放大倍数越小,视野范围越大,看到的细胞数目越多,视野越亮,工作距离越长;
放大倍数越大,视野范围越小,看到的细胞数目越少,视野越暗,工作距离越短。
故装片不能反放。
:制作:滴清水→放材料→盖片
移动:物像在何方,就将载玻片向何处移。(原因:物像移动的方向和实际移动玻片的方向相反)
:1)污点随载玻片的移动而移动,则位于载玻片上;
2)污点不随载玻片移动,换目镜后消失,则位于目镜;换物镜后消失,则位于物镜;
3)污点不随载玻片移动,换镜后也不消失,则位于反光镜上。
。使用完毕后,取下装片,转动镜头转换器,逆时针旋出物镜,旋进镜头盒;取出目镜,插进镜头盒,盖上。把显微镜放正。
实验一:观察DNA、RNA在细胞中的分布
:初步掌握观察DNA和RNA在细胞中分布的方法
:
1.***绿和吡罗红两种染色剂对DNA和RNA的亲和力不同,***绿使DNA呈现绿色,吡罗红使RNA呈现红色。利用***绿、吡罗红混合染色剂将细胞染色,可以显示DNA和RNA在细胞中的分布。
(1)能够改变细胞膜的通透性,加速染色剂进入细胞,同时(2)使染色休中的DNA和蛋白质分离,有利于DNA与染色剂结合。
:
操作步骤
注意问题
解释
取口腔上皮细胞制片
1、载玻片要洁净,滴一滴质量分数2、2、%的NaCl溶液
3、用消毒牙签在自己漱净的口腔内侧壁上轻刮几下取细胞
4、将载玻片在酒精灯下烘干
1、防止污迹干扰观察效果
2、保持细胞原有形态
3、消毒为防止感染,漱口避免取材失败
4、固定装片上的细胞
水解
将烘干的载玻片放入质量分数为8%的盐酸溶液中,用300C水浴保温5min
改变细胞膜的通透性,加速染色剂进入细胞,促进染色体的DNA与蛋白质分离而被染色
冲冼涂片
用蒸馏水的缓水流冲洗载玻片10S
洗去残留在外的盐酸
染色
滴2滴吡罗红甲绿染色剂于载玻片上染色5min
观察
先低倍镜观察,选择染色均匀、色泽浅的区域,移至视野中央,调节清晰后才换用高倍物镜观察
使观察效果最佳
实验二检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质
: 尝试用化学试剂