文档介绍：肺结核患者T细胞亚群测定分析
结核分枝杆菌引起的结核病是一种严重危害人类健康的慢性传染病,在历史上曾经夺去数以万计的生命。现在全球每年约有 800 万新感染病例,每年死亡人数将超过 400 万[1]。
我国结核病流行情况十分严峻,据文献资料全国结核杆菌感染人数超过 4 亿,活动性肺结核患者超过 600 万,在全球 22 个结核病高流行国家中居第二位,仅次于印度[2]。结核分枝杆菌是一种细胞内寄生菌,引起的免疫反应主要是细胞免疫,本研究用流式细胞技术检测分析了 2011 年4~9 月我院42 例结核患者 CD3、CD4 和 CD8 的表达,来了解细胞免疫功能在结核病人中的变化,探讨免疫功能在结核病人中所发挥的作用。现将结果报道如下。
1 研究对象
所有研究对象均为我院住院患者 42例,其中男 29 例,女13例,最小年龄 16 岁,最大年龄 78 岁,平均 岁。所有病例都经痰涂片抗酸杆菌染色或结核菌培养阳性确诊,并分为 2 组,初治组 22 例(首次发现结核菌感染,并从未经过抗结核治疗或抗结核治疗在 1 周以内),复治组 20 例(有过结核病史,进行过抗结核治疗,重新感染或者复发)。同时用 10例正常健康人作为对照组。
2 研究方法
试剂与仪器流式细胞仪为 BD FACSCanto II Floetry,CD483 混合抗体购自美国 BD公司,其中 CD4 抗体 FITC (异硫***酸荧光素)标记, CD抗体 PE (藻红蛋白)标记, CD抗体PE-Cy5标记。
试验方法
采集初治组、复治组以及对照组患者全血各 2ml,EDTA-K2 抗凝。
混匀抗凝血,取 100ul 加入试管。
加 10ulCD483 试剂,室温,避光孵育 15min。
加入 500ul 溶血素,室温,避光孵育 10min。
加入 500ulPBS(PH=,NaCL ,KCl , ,KH2PO4 ,
加双蒸水至 1000ml),室温,避光孵育 5min。
设置好测试方案,参考仪器仪器说明书。
设置好阴性对照,上机测试,有必要进行适当颜色补偿。
检测样本。
3 统计分析
结核病人初治组、复治组及对照组外周血 T 细胞亚群检测结果比较采用方差分析。男女外周血 T 细胞亚群检测结果比较采用两样本资料 t 检验。,差异无显著统计学意义;CD8 初治组、复治组、对照组 3 组比较 P>,无统计学意义,初治组、复治组 2组比较P值>,差异有显著统计学意义; CD4/CD8初治组、复治组、,差异无显著统计学意义,见表 1。
表 细胞亚群检测结果
不同性别 T细胞亚群检测结果 42 例结核病人男女外周血 T 细胞亚群检测结果比较见表 2,CD3、CD4、CD8 检测无性别差异(P>),见表2。
表 2. 不同性别 T 细胞亚群检测结果
5 讨论
近年来,结核病的发病率呈增高趋势[3]。同时,结核病也是引起 HIV感染患者死亡的重要原因之一,据报道 20