文档介绍：上海第二医科大学
硕士学位论文
人胚胎AGM区基质细胞长期培养及其性质的初步研究
姓名:田丰
申请学位级别:硕士
专业:人体解剖与组织胚胎学
指导教师:盛慧珍
20050401
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人胚胎氏赴て谂嘌捌湫灾实某醪窖芯中文详细摘要陡着对于缨蔻礤究瓣深入,越来越多静证据表鞠齑S杳逦缺W存在对造觑干细胞起支持作用的基质细胞。本实验从早期人胚胎的〔模钵舞培养势筛选穗其有较强漤殖能力酶基震绍憨究隆,并对其邋行一舔弼静检溺研究,以期进一步了解、研究人类丛椿氏赴奶匦裕⑽Q芯克目的:研究人胚胎氏赴男灾省方法:无懿环境中在解剖镜下剥取此区组织,在适当培养条件下,做原代体井培养,扩充纲施。单细胞克隆的获得及长期培养:将组织块培养扩充的细胞消化为单至小时镜下观察,标记仅含鸯筚令缨躯戆魏,俸为进一步鼹察的对象。筛选出有一定增殖能力的单细胞克隆,进行逐步扩增,长期体外传代培养。对所获细胞株的初步鉴定:对所获得的具有较强增值能力的细胞株进行细胞组织化学染色、流式细胞仪、扫描电镜、致瘤性以及正超源位点。既然窃煅8上赴脑计鹪次坏悖敲碅区必定也与造血干细胞的相互作用提供条件。取材:以人滤产的早期胚骆一的H〔亩韵螅细穗悬液,经极限稀释籍接种剿明胶簸理过的孔板中,于接种后支持造盎等硷溺。
.%为成纤维犁细胞,.%为上陂型细胞。胚胎砻自生长危机期,其后存活的细胞会经历~个较短暂的高速增组织块培养购芪逵靠山ǖ坯源嗑秎左右蛉单层蹋臌,太体上可以分为成纾维样潮脆、上皮榉绸施帮混台生长的籀胞群,并本实验接种的单细胞中肖约.%可形成单细胞究隧,其中麴缨照囊隰嚣呈瑷菜秘缀磐蛙生长:在珞券早熬悸鯬前毡榫哂薪锨康捏┞错肓Γ谒眙冀衔R恢碌募父鍪逼诮缦殖懿,然纛生长叉蓬予乎稔。在运转迄程巾,投蒎褥~楼缨熬号梢晕榷ùù鰌陨稀对髓或臻嵇枝至令淤上黪缨熬撩遴杼酌一系翻鉴定稳测表明,细胞为成纤维样的,无致瘤憾的,疑有分泌功熊的基质细胞,同时具商血管内皮细胞及芷交∠赴谋硇吞卣鳎生长过程孛缨照态瓣表达发生获骞妥无静转交,嚣虽遴过检测,说明细胞对造血细胞熙有支持作用。结论:伺咛区来源的基质细臌克隆有潜较为独特和固定的生长±赣蹙摸式,强粱绥缝女蚀瞎霰苋塘铖蟪ど纷B错盎埃苏楸臼笛轫膀髟狍晗涤敕椒ǚ到可以自然建系的细胞株是可行的,面且以缎腿为代袭的长鬏爆娥躲基质细胞株是稳定船安全的。竿戎暧肫浜澄南妆ǖ辣獳泉源的姻腿掾袭型是漆本援弱鲍,凝掇本实验的结果,我们接测绷臆将参与言俭蓟矶阈纬桑鐰篷熬搬警窝九觳卮褐苯颖韫叵怠T谫翰⒏墼嶝茫瑚蠖族椅《以戚纤维梯细胞屠多。结果:
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