文档介绍：上海第二医科大学
博士后学位论文
应用转APL融合基因模型进行白血病细胞诱导分化治疗机制的初
步研究
姓名:陈思宇
申请学位级别:博士后
专业:@
指导教师:陈赛娟;王振义
20050101
摘要应用转诤匣蚰P徒衒∠赴诱导分化治疗机制的初步研究见蠊研口丽种融合基因的产物均能阻断维甲酸信号传导通已知大多数白血病细胞存在染色体易位等特异的细胞遗传学改变。这些易位引起转录失调,干扰造血干细胞的正常分化过程,使细胞受阻于某一分化阶段。以骨髓粒系细胞发育停滞在早幼粒细胞阶段为特征,大多数患者对维甲酸的诱导研究模型。此外,还发现有十几例带;,对化疗不敏感,单用不能诱导缓解,预后较差。尽相同。为了进‘一‘步全面了解姆只柚秃陀盏挤只瘟频幕疲颐墙本研究中,、对—粜园籽并使细胞发生部分分化,核浆比缩小,泶镌龈撸赴芷谧柚驮贕冢期细胞明显减少,蛋白表达减弱,定位调变。接着,我们建立了.;蚴螅》⒉∈蠊撬柘赴芯科浞⒉过程中基因表达谱的改变,发现了一些与细胞转录调控、信号转导、周期调控、细胞防御与免疫、代谢、转运等相关基因的表达发生了调变。随后,我们以呈分化迹象,幼稚细胞比例下降。利用基因芯片技术对用药前后基因表达谱进行常常形成异常融合基因而产生相应的融合蛋白,多累及转录调节因子家族成员,颊甙籽2∠赴行;,这些特点就使晌A巳嗣怯盏贾琢鱿赴只个理想的路,但表达此两种融合蛋白的患者对全反式维甲酸的敏感性不同,猂伐、.谧H鞠赴旰妥;蛐∈笠鸬纳镅Х从σ膊病细胞的作用,发现騎联合可明显抑制/细胞增殖,或:螦鞵猂转基因发病鼠骨髓细胞。观察到细胞形态约%的行了⋯系列研究。上海第一二医科人学博汉蟪稣救龈
後?诨騊腢赴晡Q芯慷韵螅獳、分析,发现了、、、等基因在发病时的表达调变在用药后发生了逆向调变,提示这些基因在—⒉『头多条基因的调变和甊细胞在体外诱导分化过程中基因调变的趋势一致,可能是赴只讨泄餐牡骺匾蛩亍最后,为进‘步了解在赴蛲龆头只讨刑匾煨匀诤萧胍猂和的生物学作用,我们以拔榷ㄗH華治疗的几种经典药物进行比较以期找出其共同靶基因,揭示细胞分表达均有明显增加,猂騊猂的诱导表达降低了细胞对药物的敏感性。甊伐细胞对的诱导分化反应相对较敏感,而—【宝田胞反应较弱,联合应用与蛏榧量擅飨栽銮科浞从性。在药物处理后,騊鞍追植季⑸瞬煌潭鹊牡鞅洹关键词::化过程中起重要作用。其中、化、凋信号传导通路:并将对匾煨匀诤匣蛟谟盏挤只瘟浦械囊庖作进·步阐释。结果发现,各种药物对细胞有不同程度的生长增殖抑制作用,白血病,早幼粒细胞,急性:砷:组蛋白去乙酰化酶;转基因;微阵列,5谝欢娇迫搜Р㊣:后出站撒告:
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诖p鳳ぷ阌鹬秩诤匣虻牟锞茏瓒衔姿嵝藕糯ǖ纪正文引言病细胞中携带有非随机染色体易位;、分化受阻与凋习4的放化疗治疗主要是抑制肿瘤细胞的增殖,特异性较差,副作用强,在机体可能承受的条件下难以从根本卜宄琢鱿赴K孀胖琢鲅У姆⒄梗绕浒籽H逞芯的不断深入,人们对肿瘤治疗的观念逐渐由非特异性“毒性杀伤”转向特异性的“靶向治疗”,即诱导肿瘤细胞分化或凋■,从而根除恶性细胞克隆。‘个理想的研究模型。该类白血病是急性髓系白血病成为奶卣餍缘姆肿颖曛尽I偈湟煨虯患者产生;籷路,但二者在临床卜对全反式维甲酸的反应却表现坦明显不同,即表达敏感,单用不能诱导缓解,易发生ず蠼喜睢甊甊谧H鞠赴旰妥;蛐∈笠鸬纳镅Х从σ膊痪∠嗤过同样的通路呢谟盏糀细胞凋亡和分化过程中,.的生物学作用有什么不同弧┬碌目笰药物如砷剂等对本研究中,分别以—.H鞠赴旰妥;蛐∈笪模型,研究了组蛋白去乙酰化酶抑制剂或砷剂联合维甲酸对“阳性白在诱导肿瘤细胞分化方面,H嗣翘峁┝的‘种独特类型,发病率约占ァTサ腁患者白血表达—诤系鞍住猂腁患者对敏感,而表达—幕颊叨訟随着研究的深入我们迫切地需要了解,姆只柚秃陀盏挤只欠裢粜訟细胞是否有效血病细胞的诱导分化作用。上海第一二医科人学博汉蟪稣救龈,
第一部分虯訮疪阳性细胞株诱导分化的初步研究白血病恰嘣煅8上赴亩裥钥寺⌒约膊。涮氐阄?寺≈械前言白血病细胞增殖失控、分化障碍、凋亡受阻,而停滞在细胞发育的不同阶段。在骨髓和其他造血组织中自血病细胞大量增生累积,并浸润其他器官和组织,而正常造血受到抑制,是严重危害人类生命健康的造血系统恶性