文档介绍：上海第二医科大学
硕士学位论文
hVEGF基因工程生物膜的制备和鉴定
姓名:叶展
申请学位级别:硕士
专业:生物化学与分子生物学
指导教师:钱关祥

使得难以在创面上维持一个相对稳定有效的剂量,限制了应用:力/~沁血管内皮细胞生长因子翘匾熳饔糜谘9苣谄は赴囊蚬こ躺锬さ闹票负图细胞,使用根据极限稀释法筛选出龅タ寺∠赴辍4又刑中文摘要创伤愈合中最关键的过程是创面新生血管的生长,新生的血管床将为创面修复提供各种营养物质和细胞因子。加快创伤早期新生血管的生长对减少瘢痕组织形成和感染的发生有重大意义,并将最终影响到预后外观和肢体功能恢复。子,其最直接的作用就是通过加快血管内皮细胞的增殖和迁移而促进微血管形成。包括在内的许多细胞因子具有促进创伤愈合的作用,这些因子的基因工程产品有些已经试用于,临床,也显示出一定的效果。但是,由于它们的半衰期短,同时伤口存在大量的蛋白水解酶,的细胞栽体,制成基因工程生物膜,为难于愈合创面缣悄虿⌒月性溃疡闹瘟铺峁┝擞行Х椒ā本实验将含有拇┧笾柿籬导躄水平,水平和蛋白质的表达水平进行鉴定,同时使用鸡胚实验检测表达产物的生物学活性。结果显示:蚐本实验用基因工程方法改造成纤维细胞,筛选出能够持续分泌人血管内皮细胞生长因子南赴辏ǜ孟赴种灿诤鲜选出整合有蚯冶泶飄最高的一个细胞克隆在海科上第大学硬论文二医士
个月以上,并始终保持非常高的水平笛橄允舅弑附锨康伤基因治疗实验的种子细胞并在此基础上,将该细胞种植于三种生物\//一促进内皮细胞增殖的功能,而鸡胚实验则表明该工程细胞有很强的促进胚胎血管生成的作用。以上结果均说明该细胞可以作为下一步的创关键词:タ寺」こ滔赴鸅膜卓撬兀克啬ず虰,并比较其在此三种生物膜上的生程细胞不仅可以在上良好生长,而且仍旧能够表达高水平的上生长状况的定量指标,如单位面积上细胞数为的最大细胞数等等,这些工作为今后应用于临床提供了理论依据。证明蛞颜先隢一赴蜃椋琑则表明该细胞株能够表达甿瓻证实在蛋白质水平该细胞株能够持续表达长情况。结果显示:为最适支持物。进一步检测发现:该工M被嬷屏烁孟赴贐系纳で撸玫剿××.鄙ぷ刺罴眩ノ幻婊鼴苋菽、/科文第大学硕论上海二医士
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形成细胞代替自体表皮作为移植供体’5庑┓椒ǘ济媪僖桓龉位收缩橹亟ㄆ渫暾浴薄F渲械阶段是最关键的,因为在这一阶段中长入创面的新生血管为以后的修复提供了血管床,近年来在创伤的治疗研究上取得了很多进展,但如何促进大面积上采用的自体或异体的皮肤移植虽有一定疗效,但操作繁琐、成功率低,而且经常受到皮源不足的限制。所以人们研制开发出了各种能够模拟部分皮肤功能的“人工皮肤”撕,鳎褂腥嗽诔⑹允褂萌私侵键的问题,就是创面的血供。没有充足的血供,各种移植物都难以良本身和临床治疗都有重大意义。从而提供各种必需的营养物质和细胞因子。新生血管形成快慢最终将决定愈合的早晚,加快这一过程对减少感染的发生和瘢痕组织的形成有重大意义,并将影响到预后的外观和肢体功能恢复。创伤和顽固性溃疡的愈合仍然是一个尚未解决的重大问题。目前临床好生长。所以寻找一种能够有效促进创面血管生长的方法,对于愈合泌作于创面细胞¨。其中最重要的有血小板衍生生长因子,创伤的愈合是一个非常复杂的过程,不仅有创伤局部的变化,还有周围组织和器官,甚至全身的改变。综合,临床,病理和生理等方面,创伤愈合大致可分五个阶段:#寡脱仔韵赴细胞增殖,修补缺损,结缔组织生成瓷诵薷醋橹筒许多细胞因子具有促进创伤愈合的作用,它们通过自分泌和旁分成纤维细胞生长因子;ひ蜃和血管内皮细言引‘海第科学硕论上二医大士文
生长因子,其半衰期很短,而且创伤表面的渗出液中含有大量的蛋白择最合适的支持物,制备基因工程生物膜。为今后的,临床应用做准备。翘匾熳饔糜谘9苣谄は赴囊蜃印K钪苯拥淖饔镁褪峭过加快血管内皮细胞的增殖和迁移而促进微血管形成狭鉴定后将该细胞种植于,刺备基因工程生物膜并研究其生物胞生长因子等。这些因子的作用具有高效性,多效性,一种组织,如表皮和上皮细胞的分化增殖,成纤维细胞的趋化增殖和后用于临床,也显示出一定的效果。但是,由于它们大多属于多肽类的水解酶,可迅速的降解外源的生长因子沟媚岩栽诖疵嫔衔忠个相对稳定有效的剂量,限制了它们的应用。本实验的目的就是尝试建立用基因工程方法改造的能够持续分泌某种因子的成纤维细胞,并研究其在各种生物膜上的生长情况,选虻墓こ滔赴芄怀中咚降膆。本实验将入细胞,使用筛タ寺∠赴学功能,为今后的临床应用作准备。过性和网络性四大特点。它们对创伤的作用涉及愈合的各个环节和多期的凋亡,新生血管的形成等。这些因子的基因工程产品有些已经试科海第学碗上二医大士论文
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