文档介绍：土壤中寄生虫卵检测
河南省疾病预防控制中心
蔺西萌
卫生部于2006 年在全国设立了22个土源性线虫病监测点开展监测工作,监测方案中要求对每个监测点进行人群土源性线虫病监测的同时, 还需监测土壤中人蛔虫卵的污染情况。
2006~2010年的监测数据显示,%,%,%,%%,统计分析表明土壤人蛔虫卵检出率与人群蛔虫感染率呈正相关,因此土壤中蛔虫卵的污染情况是评价环境卫生状况的一项重要指标。
国家级土源性线虫监测点–淮阳
2008年随机抽取10户,分别从厨房、院子、厕所和菜地四个地点分别采取至少50g土样,分别保存备检。结果显示:在所采的10户共40份标本中,仅1份查到人受精蛔虫卵的存在(%);两份犬蛔虫卵阳性(5%);且有5个土样中查出螨卵(%)。
国家级土源性线虫监测点–淮阳
2009年结果显示:在所采的10户共40份标本中,2份查到人受精蛔虫卵(5%)。1份标本发现犬蛔虫卵阳性(%),另有3分标本发现螨虫卵(%)。
原理
采样
方法
注意事项
鉴别(受精与未受精、死活)
先用碱性溶液( 5%氢氧化钠)与土壤样品充分混合以分离蛔虫卵与土壤颗粒,再加入比重较大的液体(饱和***钠)使得比重较轻的蛔虫卵漂浮在溶液表面,收集后镜检计数。
原理
1、分别从土表及5厘米深处采取土样,因为虫卵存活时间与土层深度有关;
2、在用人粪施肥的农场和菜地可分别在陇上和犁沟中取土样,同时还应取20厘米深处的土样,以确定虫卵附着在根块植物上的可能;
3、为了测定不同局部气候条件下虫卵存活率,要从有日光照射和荫蔽区采取土样;
4、厕所、庭院、厨房取表层土;
5、每份土样约50~100g。
采样
1、土样处理:剔除菜叶、树皮等大杂物,压碎土样中的大颗粒;然后用孔径3mm的铜筛和孔径为2mm的铜筛过筛,收集过筛后的土样。
2、分离:取50ml大离心管,放入过筛后的土样10g,加5%氢氧化钠溶液至40或45ml刻度线。用橡皮塞紧塞管口,在振荡器上振荡15分钟,可反复3~4次,待充分混合后,以2000rpm,离心4min。
3、漂浮:弃去上部的氢氧化钠,加入饱和***钠溶液充分搅拌混匀,2000rpm离心4min,再加饱和***钠溶液满至管口,覆上18mm×18mm盖玻片。
4 、计数:静置15min后,将盖玻片迅速翻转取下,置于载玻片上镜检,同时再覆上第二张盖玻片,如此反复,共计数3~4张盖玻片。