文档介绍：酶联免疫吸附法在乳制品检测中的应用
摘要: 简单介绍了酶联免疚吸附法(ELISA),并且就其在乳制品检测中的应用进行了较详细的评述,主要包ELISA用于乳制品中的免疫球蛋白、乳铁蛋白、微生物及其他成分的测定。
关健词:酶联免疫吸附法,乳制品,检测
Abstract:The enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA) were introduced briefly,and application of ELISA in milk products analysis were also studied, including the determination of immunoglobulin, laotoferrin, anism, as well as the ponents.
Keywords: ELISA ,milk products ,determination
1 引言
我国的食品安全问题已不再单纯的是一般的质量问题,食品自然甚至人为地污染日趋多样化和复杂化,紧抓食品安全控制成为了关系国计民生的大事,人民和政府的高度重视迫使食品科技不断增加新的检验项目,特别是随着生活质量的提高,人们对于乳制品的需求越来越大,乳制品的安全检测问题也就越发突出。利用新的科技手段不断提高检验水平、质量和效率。现今,食品安全检测正朝着快速、灵敏、简便的方向发展。酶联免疫技术正是迎合了这一方向而被越来越多地应用于乳制品检验领域的。
2 酶联免疫吸附法的概述
酶联免疫吸附法(Enzyme-Linked Immunes or bent Assay,简称ELISA),又称酶标法,是在20世纪60年代在免疫荧光和组织化学基础上发展起来的一种新技术, 1966年,Nakane和Avrameas首先用酶标记抗体在普通光学显微镜下定位抗原。1971年,Engvall和Perlman以及Weeman和Schuurs仿照放射免疫测定法(RIA)的竞争性测定原理,使酶标抗原与待测标本中的未标记的抗原,竞争结合一定量的抗体,然后分离游离的和结合的标记抗原,测定酶活性,即可得到待测抗原量。次年,Engvall等改用酶标记免疫球蛋白,提高了标记效率,避免了半抗原标记困难的问题,也简化了操作手续[1]。目前,ELISA技术已广泛应用在临床医学、兽医学、生物学等领域的检测中,但在食品安全领域中应用相对较少。因此ELISA在食品安全检测中的应用仍有待于进一步的深入研究。由于ELISA检测技术特异性高、灵敏性强,并且食品安全问题日益受到消费者、学术界和各级政府的密切关注,所以ELISA在食品安全检测中的研究和应用也越来越多。本文主要对ELISA法原理、分类及在乳制品检测中的应用进展进行了综述,希望能对ELISA在乳制品检测中的发展起到一定的作用。
3 ELISA的测定原理和方法
ELISA的测定原理
ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记, 即利用聚苯乙烯微量反应板(或球)吸附抗原或者抗体
,使之固相化后,结合在固相载体表面的抗原或抗体既保持其免疫学活性又保留酶的活性。在测定时,受检标本(测定其中的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开,