文档介绍:五、蛋白质的结构
(一)、蛋白质分子的概念
蛋白质分子:由一条或一条以上的多肽(polypeptide)链按各自特殊的方式组合而成的具有完整生物活性的蛋白质的最小单位。
蛋白质与多肽并无严格的界线,通常是将分子量在6000道尔顿以上的多肽称为蛋白质。
蛋白质分子量变化范围很大, 从大约6000到1000000道尔顿甚至更大。
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(二)、蛋白质的一级结构(primary structure) (初级结构、肽链结构、化学结构)
1. 定义:指蛋白质分子中氨基酸连接成肽链的方式和排列顺序。是蛋白质最基本的结构,它是由基因上遗传密码的排列顺序决定的。它是蛋白质生物功能的基础。
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蛋白质氨基酸顺序的测定是蛋白质化学研究的基础。,现在已经有上千种不同蛋白质的一级结构被测定。
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基本要求:
a、样品必需纯(>97%以上);
b、知道蛋白质的分子量;
c、知道蛋白质由几个亚基组成;
(1)测定蛋白质一级结构的原则
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遵循原则:
(1)提纯蛋白质样品。
(2)测定NH2末端基的数目,由此确定蛋白质分子由几条链组成。
(3)拆开二硫键,将蛋白质分子中的几条链拆开,并分离出每条肽链得到伸展的肽链。
(4)肽链的一部分样品进行完全水解,测定其氨基酸组成,由此确定各种氨基酸成分的分子比
(5)肽链的另一部分样品进行NH2和COOH末端基鉴定。
(6)应用两种或两种以上不同的水解方法将所要测定的蛋白质肽链断裂,各得到一系列大小不同的肽段。
(7)分离提纯所产生的每个肽段,并测定其氨基酸顺序。
(8)从有重叠结构的各个肽的氨基酸顺序中推断出蛋白质中全部氨基酸排列顺序。
(1)测定蛋白质一级结构的原则
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