文档介绍：上海第二医科大学
硕士学位论文
犬脐血间质干细胞的肌源性分化
姓名:罗凯
申请学位级别:硕士
专业:外科学(心胸外)
指导教师:单根法

脐血间质干细胞的肌源性分化中文详细摘要方法选取不同孕龄的妊娠杂种犬,按照正规的动物试验操作,在无菌条部、肋间部骨骼肌和心肌组织作为其阳性对照。胞形态不规则,增殖缓慢:脐血细胞在培养过程中可观察到两类不同的细胞,目的建立一套脐血间质干细胞在体外条件下的采集、分离、传代、扩增的比较成熟和稳定的方法;了解脐血间质干细胞表面抗原的表达;观察脐血间质干细胞在一定诱导条件下向肌源性细胞的分化能力。件下采集犬脐带血,离心后接种于。%南赴嘌肪持校直鹧择、,在相同的条件下观察脐血细胞在不同的培养基中的生长增殖情况;选择不同浓度的胰酶.%陨ぶ%融合的脐血间质干细胞进行消化传代处理;选择生长至%%融合的脐血贴壁细胞,采用间接法,检测脐血细胞、、和等一系列表面抗原的表达;分别选择第二代、第四代和第六代的脐血间质干细胞作为肌源性诱导分化的对象,不同浓度的疞、/疞魑S盏挤只粒作用小时,分别于第一周、第二周和第三周在镜下观察脐血细胞形态结构的动态改变,同时检测经產处理后的脐血间质干细胞等肌源性特异性标记物的表达,并以成年杂种犬的颈结果共采集例不同孕龄、胎数和体重的妊娠杂种犬脐带血,犬的孕龄越长、胎数越多,脐血间质干细胞的数量和质量相对越低。脐血间质干细胞在和旌舷赴嘌褐猩ち己茫赴翁#ぴ鲋逞速,而在、和狪绕渌旌舷赴嘌褐猩ぴ鲋巢簧趵硐耄一类为典型的纤维母细胞样细胞,梭形或纺锤形,细胞增殖迅速,一类为破骨细胞样细胞,圆形或椭圆形,细胞体积巨大,核大,呈分叶状,细胞增殖缓慢。脐血间质干细胞在%
关键词胞可增殖约倍,细胞在第五代前可保持稳定的形态和增殖能力,而在之后细胞逐渐出现老化趋势,细胞内颗粒状物质增多,增殖能力下降。脐血间质干细胞表达,,不表达和。第二代和第四代的脐血间质干细胞在/作用后形态逐渐发生改变,细胞体积延长,形成伪足样胞浆突起,并与俳赴⒘樱处理后的脐血间部骨骼肌和心肌表达產,,同样不表达结论犬脐血贴壁细胞中包含两类不同的细胞,其中间质干细胞是一类不同于造血干细胞的处于原始未分化状态的干/祖细胞,间质干细胞的数量和质量与妊娠犬的孕龄和胎数等因素存在一定关系:脐血间质干细胞在诱导分化剂的作用下可向肌源性细胞定向分化,为干细胞心肌移植的治疗提供了新的细胞材料来源和思路。脐血;间质干细胞;心肌再生质干细胞表达蚫槐泶颩,阳性对照组中,犬颈部、肋间中文详细摘要,
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前言心肌细胞数量的减少,纤维瘢痕组织增生以替代坏死心肌细胞,最终导致心肌能在一定程度上缓解冠心病患者的心肌缺血情况,减少冠心病的复发,但并不近年来由于国民经济的发展,人们的生活习惯和饮食结构有了明显的改变,我国的疾病谱也随之发生了明显的变化,心血管疾病尤其是冠状动脉粥样硬化性心脏病谛牟越来越成为危害我国人民健康的主要疾病,其发生率和死亡率逐年提高。在年我国城市居民主要疾病死亡率统计中,心血管疾病占第三位,死亡率达到./万,男性略高于女性行裕/万,女传统理论认为,人体在出生后不久,随着幼稚的心肌细胞不断的分化成熟,心肌细胞最终永久的退出细胞增殖周期,彻底丧失增生能力,学者们称其为终末分化细胞。组织形态学研究证实,成熟的心肌组织中缺乏具有增殖能力的千细胞,因而一旦心肌细胞在各种因素的作用下缧募」H⑿募⊙椎造成不可逆的损伤,导致心肌细胞的死亡,成熟的心肌组织不能通过残余心肌细胞或心肌干细胞的再生作用进行修复,从而导致结构的重建,残存心肌细胞弹性下降,心脏壁扩张变薄,心功能降低,直至心肌失代偿,出现心功能衰竭,极大影响患者的生活质量甚至造成死亡啊目前对冠心病的治疗主要包括内科药物治疗、介入治疗和外科手术治疗。传统的药物仅限于对患者的对症治疗,而新近开展的介入治疗和冠脉搭桥术虽能从根本上恢复心肌细胞的数量;异体心脏移植由于供体来源有限和移植排斥反应等因素限制了临床的大规模开展,因而寻找一条治疗冠心病的更好的手段随着对干细胞认识的不断深入,利用于细胞移植治疗冠心病的理论逐渐引起了人们的重视。干细胞是一类具有自我更新和分化潜能的细胞,在适当的条件下可通过不对称分裂蚰持痔囟ǖ淖橹赴只学者们设想将干细胞移植到梗塞心肌组织中,通过调控其分化方向,使其向成性:./万就成为医务工作者的当务之急。一高目
冠心病的目的,这一技术称为心肌细胞重建术蛐研究者对不同来源的干细胞进行了试验研究。早期