文档介绍：HPLC法测定复方穿心莲片中脱水穿心莲内酯的含量
[摘要] 目的用高效液相色谱法测定复方穿心莲片中脱水穿心莲内酯的含量。方法采用Dia-monsil C18柱(200 mm× mm,5 μm),以甲醇-水((52∶48)为流动相;流速: mL/min;检测波长:250 nm。~ μg,r = 8;%,%。结论本法简便、灵敏、准确。
[关键词] 高效液相色谱法;复方穿心莲片;脱水穿心莲内酯;含量测定
[中图分类号] [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721(2013)01(c)-0062-02
复方穿心莲片是以穿心莲、路边青药材制成的内服制剂,具有清热解毒、凉血、利湿的功效,用于风热感冒、喉痹等疾病[1]。本文采用HPLC法对制剂中的有效成分脱水穿心莲内酯进行含量测定,所建立的方法准确可靠、专属性强、稳定,可用于该制剂的质量控制。现报道如下:
1 仪器与试药
仪器:Agilent LC-1260高效液相色谱议(美国)、Agilent LC-1200DAD检测器;AD204-S电子天平;KQ-300DE超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)。复方穿心莲片样品(广州白云山和记黄埔中药有限公司,批号:C1D001、C1D002、C1D003),甲醇(色谱纯,天津市大茂化学试剂厂);水为纯净水;脱水穿心莲内酯对照品(中国药品生物制品检定所,批号:110854~200306);
2 方法与结果
色谱条件
色谱柱:Dia-monsil C18(200 mm× mm,5 μm);流动相:甲醇-水(52∶48);流速: mL/min;柱温:25℃;检测波长为250 nm。进样量10 μL,理论塔板数按脱水穿心莲内酯峰计,应不低于2 500[2-4]。
溶液制备
对照品溶液的制备取脱水穿心莲内酯适量,精密称定,加甲醇制成每1 毫升含20 μg的溶液,摇匀,即得。
g,精密称定,置50 mL量瓶中,加入甲醇约45 mL,超声处理30 min,取出,放冷,用甲醇定容至刻度,滤过,取续滤液,即得。
阴性对照溶液的制备按处方比例,取缺穿心莲的其他各味药材,按供试品制备方法制成阴性对照溶液。
干扰试验
取脱水穿心莲内酯对照品溶液、供试品溶液及缺穿心莲药材的阴性对照溶液各10 μL注入液相色谱仪,记录色谱。从图谱可以看出,在此色谱条件下,脱水穿心莲内酯峰与其他组分峰分离完全,在与脱水穿心莲内酯峰相同的保留时间处,阴性对照无干扰,见图1、2、3。
线性关系考察
mg,置50 mL量瓶中,加甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀,再精密吸2 mL至25 mL容量瓶中,用甲醇溶液稀释至刻度,分别进样2、6、10、14、18 μL,测定峰面积,以脱水穿心莲内酯浓度(μg)为横坐标(X),峰面积积分值(A)为纵坐标(Y),计算脱水穿心莲内酯回归方程为:Y = + 2,r = 8。结果表明,脱水穿