文档介绍：上海交通大学
硕士学位论文
质粒AmpC酶的流行分布及CMY-2型质粒AmpC酶的研究
姓名:李轶
申请学位级别:硕士
专业:临床检验诊断学
指导教师:倪语星;高峰
20070425
质粒 AmpC 酶的流行分布及 CMY-2 型质粒
AmpC 酶的研究

摘要

目的:调查上海交通大学附属第六人民医院大肠埃希菌、肺炎克
雷伯菌、产酸克雷伯菌中质粒 AmpC 酶的流行分布。研究本医院产
CMY-2 型质粒 AmpC 酶菌株的多重耐药特点
方法:①对 1935 株细菌采用标准纸片扩散法、三维试验筛选
AmpC 酶;多重 PCR 确认质粒 AmpC 酶;RAPD 分析流行病学特点,
纸片法检测合并 ESBL 的情况。②对第一部分实验中确认为产 CIT 群
质粒 AmpC 酶的菌株进行 PCR、克隆、测序;接合试验证实耐药基
因的可传递性;微量稀释法测定 MIC;PCR 及测序确定 ESBL 的基
因型;等电聚焦电泳检测细菌β-内酰胺酶等电点。
结果:①1935 株细菌中,54 株(%)产质粒 AmpC 酶,其中 41
株为 DHA 群,13 株为 CIT 群。②大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、产酸
克雷伯菌中的阳性率分别为 %、%、%。③RAPD 结果显
示我院的产质粒 AmpC 酶细菌以非克隆传播为主。④产质粒 AmpC
酶的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌分别有 % (18/23) 和 62% (18/29)
同时产 ESBL。⑤PCR、测序及 IEF 结果表明,13 株 CIT 群细菌所携
带 AmpC 酶基因均为 blaCMY-2(),且均携带 blaTEM-1(),9 株
同时携带 blaCTX-M-14(),无菌株携带 blaSHV-like;, 的酶受
克拉维酸抑制而不受氯唑西林抑制, 的酶受氯唑西林抑制而不
受克拉维酸抑制;⑥13 株 CIT 群细菌有四株接合实验阳性,经 PCR
证实接合子均携带 blaCMY-2,并有一株同时传递了 blaCTX-M-14。⑦多数
产 CMY-2 型酶的细菌呈多重耐药,并有一株菌对碳青霉烯类药物耐
药。
结论:①我院质粒 AmpC 酶的阳性率为 %;以 DHA-1 型质
粒 AmpC 酶及产 DHA-1 的肺炎克雷伯菌为主;以非克隆传播为主;
②首次在上海地区发现 CMY-2 型质粒 AmpC 酶;③质粒 AmpC 酶合
并 ESBL 的阳性率较高,CMY-2 型质粒 AmpC 酶主要和 CTX-M-14
型 ESBL 同时存在。④产质粒 AmpC 酶细菌耐药情况严重
关键词:质粒、AmpC、β-内酰胺酶、大肠埃希菌、克雷伯菌、
CMY-2、DHA-1
The prevalence of plasmid-mediated AmpC β-lactamases and the
characterization of CMY-2-type plasmid-mediated AmpC
β-lactamase

ABSTRACT
Objective:The aim of this study is to investigate the prevalence of
plasmid-mediated AmpC β-lactamases (PABLs) in Escherichia coli and
Klebsiella spp. Sixth Affiliate Hospital of Shanghai Jiao Tong University
in China.
Methods : 1935 consecutive nonrepeat clinical isolates of
Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, and Klebsiella oxytoca were
collected from Sixth Affiliate Hospital of Shanghai Jiao Tong University
between January 2003 and July 2005. The isolates with cefoxitin zone
diameters less than 18 mm (screen positive) were selected for polymerase
chain reaction amplification of the blaAmpC gen