文档介绍：3
2
2 2
2 2
2
2
第 30 卷分析化学(FENXI HUAXUE) 研究简报第 3 期

2002 年 3 月 Chinese Journal of Analytical Chemistry 307~311
芯片式流通池顺序注射可更新
表面反射光谱法用于酶反应检测
王建雅方肇伦徐淑坤
(东北大学分析科学研究中心, 沈阳 110004)
摘要将芯片式流通池顺序注射可更新表面反射光谱法用于酶反应检测。HRP 催化 H2O2 氧化 BPR 底物
2 2 2 2
的反应用于对 H2O2 的检测。此反应体系与葡萄糖氧化酶联用,用于对血清中葡萄糖的检测。
关键词芯片式流通池,顺序注射可更新表面,反射光谱,酶反应
1 引言
将固体微珠做为试剂的载体, 通过流动注射或顺序注射系统将微珠注入检测系统并随后排废的流
动注射可更新表面技术(FI RST ,flow injection renewable surface technique) 是流动注射分析的前沿领域之
一1 ,该技术在痕量分析及生物分析中仍处于发展初期。具有可对微珠进行截留和排放功能的流通池
是 FI - RST 系统的关键部件,适合于不同检测方法的流通池已见报道2 ~7 。本文提出了一种加工简便、
结构简单的新型芯片式流通池,将其用于流动注射可更新表面反射光谱法检测。以过氧化物酶催化,显
色的氢授体底物与 H2O2 反应的分光光度法检测 H2O2 已被广泛地用于生物分析中。近来文献报道了无
偶联剂的偶氮萘酚衍生物8 作为氢授体用于此类检测。本文将溴代邻苯三酚红(bromopyrogallol red ,
BPR) 、辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase , HRP) 、H2O2 催化反应体系用于对 H2O2 的检测,并与葡萄
糖氧化酶(glucose oxidase , GOD) 催化体系联用, 用于检测葡萄糖。
2 实验部分
2. 1 试剂
辣根过氧化物酶( E. C. 1. 11. 1. 7 , 268 U/ mg , RZ > 3. 1 , Sigma) 。葡萄糖氧化酶(115 U/ mg , Toyobo
Co. , Ltd . , Japan) 。血糖试剂盒( GLU Kit , 北京北化精细化学品公司) 。溴代邻苯三酚红(上海试剂三
厂) 。Polysorb ACT 1 C 18 微珠(Transgenomic , Omaha , USA) , 微珠直径 20~60μm。实验中所用试剂均
为分析纯,去离子水经脱气处理。
2. 2 仪器
顺序注射(SI) 系统由 ASD 10 注射泵(Bodenseewerk , Perkin Elmer , Uberlingen , Germany) 和 10 位选择
阀(Valco , Houston , TX , USA) 组成,配 5 mL 针筒。选择阀和注射泵的操作由计算机同步控制。自制直
径 20 mm 铜芯加热棒,30 W ,XMT 数显控温仪(CHNT Group Corporation ,China) 控温± 1. 0 ℃,加热棒密闭
于套管中。722 型光栅分光光度计(山东高密分析仪器厂) 。