文档介绍：仪器分析
供药学类、中药学类、制药工程及相关专业使用
全国普通高等中医药院校药学类专业“十三五”规划教材(第二轮规划教材)
第十二章 经典液相色谱法(LC)
经典液相色谱法 LC
吸附色谱法
分配色谱法
离子交换色谱法
凝胶色谱法(分子排阻色谱法)
聚酰***色谱法
平面色谱法
薄层色谱法纸色谱法
第五节聚酰***色谱法
基本原理
应用
聚酰***色谱法
以聚酰***为固定相的色谱法叫做聚酰***色谱法。
聚酰***是由酰***聚合而成的一类高分子化合物。锦纶-6和锦纶-66是两种最为常用的色谱用聚酰***,它们的亲水亲脂性能都好。既能分离极性物质,又能分离非极性物质。
聚酰***可溶于浓盐酸、甲酸,微溶于乙酸、苯酚等溶剂,不溶于水、甲醇、乙醇、***、***、***仿、苯等常用溶剂;对碱较稳定,对酸特别是无机酸稳定性差,温度高时更敏感。
一、基本原理
聚酰***色谱的分离机制表现为两个方面。
(一)氢键吸附
聚酰***分子内的酰***键可与酚类、酸类、醌类、硝基化合物形成氢键吸附作用。例如酚类(包括黄***类、鞣质等)、酸类化合物的羟基与酰***基的羰基形成氢键,芳香硝基化合物、醌类化合物的硝基(或醌基)与酰***键的游离***基形成氢键。
吸附作用的大小与形成氢键能力的强弱有关,通常在水中形成氢键的能力最强,在有机溶剂中较弱,在碱性溶液中最弱。
图12-7 聚酰***吸附作用示意图
1. 形成氢键的基团数越多,吸附能力越强。
2. 形成氢键的能力与形成氢键的基团的位置有关,例如间位、对位酚羟基使吸附力增大,邻位使吸附力减小。
3. 芳香核、共轭双键越多,吸附力越大。
4. 分子内氢键的形成使化合物吸附力减小。
(二)双重色谱
有许多现象难以用氢键吸附解释,如对萜类、甾类、生物碱等也可以用聚酰***分离;又如黄***苷元与苷的分离,若以甲醇-水作流动相,黄***苷比其苷元先被洗脱,而用非极性溶剂作流动相,结果恰恰相反。
聚酰***分子中既有亲水基团又有亲脂基团,当用极性溶剂(如含水溶剂)作流动相时,聚酰***中的烷基作为非极性固定相,其色谱行为类似于反相分配色谱,因黄***苷的极性大于苷元,所以黄***苷比苷元容易洗脱;当用非极性流动相(如三***甲烷—甲醇)时,聚酰***则作为极性固定相,其色谱行为类似于正相分配色谱。黄***苷元的极性小于黄***苷,因而黄***苷元易被洗脱。此即双重色谱。双重色谱只适用于难与聚酰***形成氢键或形成氢键能力弱的化合物,如萜类、甾类、生物碱、糖类、某些酚类、黄***类、酸类等。
二、应用
聚酰***色谱按其操作形式可分为柱色谱和薄膜色谱。
可分离黄***类、酚类、有机酸、生物碱、萜类、甾类、苷类、糖类、氨基酸衍生物、核苷类等物质。