文档介绍:第五章微生物的生长
繁殖与生存因子
生物个体物质有规律地、不可逆增加,导致个体
体积扩大的生物学过程。
生长:
生物个体生长到一定阶段,通过特定方式产生新的
生命个体,即引起生命个体数量增加的生物学过程。
繁殖:
生长是一个逐步发生的量变过程,
繁殖是一个产生新的生命个体的质变过程。
在高等生物里这两个过程可以明显分开,但在低等特别是在单
细胞的生物里,由于细胞小,这两个过程是紧密联系又很难划
分的过程。
第一节微生物的生长繁殖
一个微生物细胞
合适的外界条件,吸收营养物质,进行代谢。
如果同化作用的速度超过了异化作用
个体的生长
原生质的总量(重量、体积、大小)就不断增加
如果各细胞组分是按恰当的比例增长时,则达到一定程度后就
会发生繁殖,引起个体数目的增加。
群体内各个个体的进一步生长
群体的生长
一、微生物生长的测定:
单位时间里微生物数量或生物量(Biomass)的变化
微生物生长:
微生物生长的测定:
个体计数
群体重量测定
群体生理指标测定
评价培养条件、营养物质等对微生物生长的影响;
评价不同的抗菌物质对微生物产生抑制(或杀死)作用的效果;
客观地反映微生物生长的规律;
(一)以数量变化对微生物生长情况进行测定
1、培养平板计数法
采用培养平板计数法要求操作熟练
、准确,否则难以得到正确的结果:
样品充分混匀;
每支移液管及涂布棒只能接触一个
稀释度的菌液;
同一稀释度三个以上重复,取平均值;
每个平板上的菌落数目合适,便于
准确计数;
一个菌落可能是多个细胞一起形成,所以在科研中一般用
菌落形成单位(colony forming units, CFU)来表示,而
不是直接表示为细胞数。
2、膜过滤培养法
当样品中菌数很低时,可以将一定体积的湖水、海水或饮用水等样
品通过膜过滤器,然后将将膜转到相应的培养基上进行培养,对形
成的菌落进行统计。
3、The most probable number method(液体稀释法)
主要适用于只能进行液体培养的微生
物,或采用液体鉴别培养基进行直接
鉴定并计数的微生物。
对未知样品进行十倍稀释,然后根据估算取三个连续的稀释度
平行接种多支试管,对这些平行试管的微生物生长情况进行统
计,长菌的为阳性,未长菌的为阴性,然后根据数学统计计算
出样品中的微生物数目。
4、显微镜直接计数法
1)常规方法:
缺点:
不能区分死菌与活菌;
不适于对运动细菌的计数;
需要相对高的细菌浓度;
个体小的细菌在显微镜下难以观察;
2)其它方法:
将已知颗粒浓度的样品(例如血液)与待测细胞细胞浓度的样品混匀
后在显微镜下根据二者之间的比例直接推算待测微生物细胞浓度。
比例计数:
过滤计数:
当样品中菌数很低时,可以将一定体积的湖水、海水或饮用水等样品
通过膜过滤器。然后将滤膜干燥、染色,并经处理使膜透明,再在显
微镜下计算膜上(或一定面积中)的细菌数;
活菌计数:
采用特定的染色技术也可分别对活菌和死菌进行分别计数