文档介绍：人胎球蛋白A检测试剂盒(酶联免疫法)
(德国DRG EIA4522)
预期用途
此试剂盒可用于血清,血浆,细胞上清,组织提取物和尿液中人胎球蛋白A也称之为α-2-HS糖蛋白的定量的检测;血清或血浆中胎球蛋白A的检测可作为某些癌症及基因遗传缺陷的血清蛋白诊断的辅助工具;此试剂盒仅供实验室专业人士使用
简介
胎球蛋白A也称之为α-2-HS糖蛋白,是由两个氨基末端抑制域和一个较小的羧基末端域组成的59 kDa 分子量的糖蛋白;由肝脏合成,分泌至血流,-;婴儿期的血清胎球蛋白A含量高,参与蛋白酶抑制活性,与钙代谢和骨生成调节相关;累积于骨和牙齿内,作为生物学上非胶原骨蛋白的主要部分,研究表明,胎球蛋白A是循环中主要的钙化抑制剂;干涉钙盐沉淀;近期研究显示低水平胎球蛋白A的慢性肾脏衰竭患者与心血管病的高死亡率显著相关;另一方面,糖尿病老年人血清胎球蛋白A含量比正常人高,这是独立于胰岛素抑制剂的其他标记物;另外,高胎球蛋白A水平还可作为心血管疾病的的危险标记物
实验原理
此试剂盒可用于血清样本中人胎球蛋白A的定量检测;采用双位点夹心法,羊抗人胎球蛋白A多抗结合人胎球蛋白A的不同位点
将含人胎球蛋白A的试验标准品,质控品和预稀释样本加至包被了高度亲和羊抗人胎球蛋白A多抗的微孔内,第一次孵育,包被抗体捕获样本中的人胎球蛋白A,未结合的蛋白洗板除去,然后加入HRP标记的抗人胎球蛋白A酶联物加入至每孔,“夹心-人胎球蛋白A-HRP-标记的酶联物”形成夹心,未结合的示踪抗体通过洗板除去,结合于包被板上的HRP酶免物与底物液定时反应,然后在酶标仪上检测;结合于包被胎球蛋白A上示踪抗体酶活性与样本中胎球蛋白A的含量直接相关,在点对点或三次回归模式下以标准品的浓度比上OD值绘制标准曲线,样本中的胎球蛋白A可直接从标准曲线上得到
试剂:准备与贮存
此试剂盒收到后立即贮存于2-8℃下,效期见试剂盒标签;所有成分在2-8℃下可保存至有效期
使用前,所有试剂平衡至室温,不同批次的试剂不能交换使用
包被板,96孔,包被了抗人胎球蛋白A抗体;微孔板固定于板架上,密封于含有干燥剂的铝箔密封袋内;贮存于2-8℃至有效期
胎球蛋白A示踪抗体,1瓶, ml,浓缩,HRP标记的抗人胎球蛋白A示踪抗体溶于稳定的蛋白基质中;此试剂使用前需用示踪剂抗体稀释液进行稀释;贮存于2-8℃至有效期
示踪抗体稀释液,1瓶,11ml,即用,Trizma盐酸溶于缓冲液;根据实验步骤用于示踪抗体稀释;贮存于2-8℃至有效期
试验缓冲液,浓缩,1瓶,11ml,含牛血清白蛋白的磷酸缓冲盐;建议使用前以1:10比例用双蒸水稀释(如11 ml浓缩+99 ml的双蒸水);贮存于2-8℃至有效期
洗涤液,浓缩,1瓶,20ml,30倍浓缩;试验前需用580ml的双蒸水稀释,混匀;一旦稀释,不含叠氮化物防腐剂的磷酸缓冲盐洗涤液会含表面活性剂;稀释的洗涤液在室温下可保存至效期
HRP底物液;1瓶,12ml,含过氧化氢的TMB底物液;贮存于2-8℃至有效期
终止液,1瓶,12ml,,贮存于2-8℃至有效期
胎球蛋白A标准品,5瓶,含胎球蛋白A,不含叠氮化物防腐剂的液态牛血清基质;各标准品浓度见瓶子标签;3次冻存周期使用后,所有标准品保存至-