文档介绍：2018/10/17
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光化学内化转染法
光动力疗法(Photodynamic therapy, PDT)
基本机制
S
1S*
3S*
S+1O2
O2
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光化学内化转染法
也称为“光化学基因转染”(photochemical gene transfection, PCGT)。是新近发展起来的一种基因转染技术,它通过特定波长的光激活位于靶细胞内吞泡中的光敏剂,启动光化学反应,产生单态氧1O2和三态氧3O2等活性氧成分。单态氧是强有力的氧化剂,可氧化多种分子如不饱和脂肪酸、某些氨基酸、核酸碱基等,从而诱导多种细胞结构损伤。
光化学内化转染(photochemical internalization)
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光化学内化转染法
光化学内化转染(photochemical internalization)
单态氧寿命非常短暂(),扩散范围极短,只有非常接近光敏剂所在的细胞器才能受到单态氧的作用。这样,通过光化学反应导致内吞泡膜损伤,释放泡内转染基因进入胞浆,从而顺利入核实现转染。
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光化学内化转染法
理论上适用于所有可以发生内吞作用的哺乳动物细胞
光照剂量的依赖性
转染效率与细胞类型有关
使用的光敏剂通常应符合以下条件
应主要分布于内吞泡
应优先分布于内吞泡膜
光敏剂在细胞内聚集程度小
光化学内化转染法的特点
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光化学内化转染法
转染效率较常规方法高
依赖光照的局部活化特性保证转染位点的高度特异性
特别适合于其他治疗方法联合使用
与靶细胞表面特异分子表达无关,应用范围广
肿瘤光敏剂在肿瘤附近组织的富集作用可用于肿瘤治疗
光化学内化转染法的优点
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微粒靶向激光转染法
基本机制
光吸收性微粒被特异性地与细胞结合,并将要转染的分子(如质粒)放置于细胞溶液中。然后用激光照射细胞,即可使细胞膜的通透性发生改变,从而可以使原本无法通过细胞膜的生物大分子顺利通过细胞膜,完成转染的过程。
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微粒靶向激光转染法
最初的实验
2003年,Pitsillides等在研究中发