文档介绍：细菌的分离培养与接种技术
同济医院检验科
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细菌实验室
进行细菌学实验的场所,标本的接种、培养、分离、鉴定、药敏等工作在此完成。
细菌室要防止外界污染,还要避免细菌播散。
配备紫外灯、消毒剂等。注意定期消毒。
对无菌物品和标本应明显分开放于指定位置,同时要对用过的物品及时进行灭菌处理。
保证细菌室的温度。
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无菌实验室
是细菌实验室内用于无菌操作的小室,要求更严格。
完全封闭,应有缓冲区。
用前要用紫外灯消毒30min,定期用甲醛熏蒸消毒。
仅限于分装培养基及传染性强的细菌接种。
要保证本室的无菌状态。
保证本室的温度。
无菌实验室可用超净工作台代替。
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培养基
常用玻璃器材的准备
培养基的成分和作用
培养基的种类
培养基的制备
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培养基的成分和作用
培养基:是指人工配制的适合细菌生长繁殖的综合营养基质。
(1) 营养物质:蛋白胨(氮源)、肉浸液(氮源和碳源)、牛肉膏、糖醇类、血液、鸡蛋和动物血清、生长因子、无机盐类
(2) 水
(3) 凝固剂:琼脂、明胶
(4) 抑制剂:非生长必需,而是选择、鉴定及判断结果的需要
(5) 指示剂:便于观察细菌
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培养基的种类(按用途分类)
基础培养基:培养营养要求不高的细菌,如普通平板
营养培养基:能满足营养需求较高细菌的生长,如血平板
鉴别培养基:含有某些特定的底物,用于鉴别细菌,如克氏双糖培养基(KIA)
选择培养基:具有选择性抑制作用,用于选择性的培养目的菌,如SS平板
增菌培养基:促进目的菌的生长,适用于含菌量较少的标本,如葡萄糖肉汤。
厌氧培养基:用于培养厌氧菌
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培养基的种类(按物理性状分类)
液体培养基:不含凝固剂,用于增菌和接种纯种细菌。
半固体培养基:%~%琼脂,用于观察细菌的动力。
固体培养基:含2%~%琼脂,多用于细菌的分离培养。
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培养基的制备
玻璃器皿的消毒灭菌
制备的程序
调配
溶化
矫正pH
过滤澄清
分装
灭菌
鉴定
保存
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