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二0 年月
抗人嗫寺】固逯票讣凹觳庠戮3跆中文摘要专业法医学硕士研究生陈森导师陆惠玲教授将已构建好的重组的原核表达载体./转化到大肠杆菌V薪杏盏急泶铮ū泶锏幕式鹗舻鞍酌鞍状炕竺庖叽菩孕挛骼纪茫票缚筂—蛋白的多克隆抗体。通过免疫印迹际跹橹た筂—蛋白多克隆抗体的特异性,用椒ú。进而通过免疫组织化学染色方法探讨该抗体区分月经血与外周血的可行性。以期为建立用固蹇速、准确检测月经血的免疫学方法提供建设性意见。解决法医学实践中月经血鉴定困难的现实问题,对于保护妇女权益及维护社会稳定等都具有极其重要的社会现实意义。一、鞍椎谋泶本试验首先制备感受态大肠杆菌,将一一疢一转入感受态中,用含氨苄青霉素的培养液培养,挑选阳性克隆,用和双酶切法鉴定,。—、/.疞⒉煌盏际眆司和不同诱导温度、中山大学硕士学位论文抗人嗫寺】固逯聘骷凹觳庠戮3跆,
。下蛋白量表达的研究,选择实验的最佳诱导条件为。盏琁度为W詈蠼盏急泶锏娜诤系鞍子氡曜伎筂一单克隆抗体进行分析,、抗固逯票将含有目的融合蛋白的菌液经狿缬荆钊∧康奶醮直鹗褂研磨后加佐剂免疫兔和直接免疫兔两种方法,免疫魏蟛杉寡G澹ズ土酸铵沉淀法纯化抗体,用浣臃ú舛ǹ寡G逍Ъ鄞:C庖哂〖<术检测结果表明两种免疫方法都可以获得特异性抗抗体。三、月经血检测初探取】抵驹刚咴戮芷诘谝弧⒌诙煸戮<捌渚猜鲅M科米灾瓶血清作为第一抗体,生物素标记羊抗兔5诙固澹庖咦榛旧ū砻鞍状嬖谟诩渲氏赴白庸谀ど掀は赴冢痪猜鲅M科醇旧ā例子宫内膜组织切片检测结果可知,。说明自制抗体能有效的检测佣衷戮:途猜鲅!结论:从己构建的重组原核表达载体一一疢一中,;,成功获得兔抗嗫寺】固澹Ъ鄞飈:陨希痪戮M科和子宫内膜组织切片的免疫组化分析结果表明,自制的多克隆抗体具有较强的组织特异性。关键词:多克隆抗体,月经血中山大学硕士学位论文抗人嗫寺】固逯聘骷凹觳庠戮3跆
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检测月经血的现状及其不足在法医血迹检验领域内,鉴定血迹的来源具有重要的理论及现实意义。尤其是在性侵害案件的调查中,需要特别对现场血迹分析,鉴定其属于月经血还是属于处女膜破裂出血或其他损伤出血。经典的月经血检测方法有两种:一是细胞学检查,通过特殊染色后用显微镜检验,以找到子宫内膜细胞、阴道或宫颈鳞状上皮细胞为准;另一种方法是检验月经血中的变性纤维蛋白。因为月经血富含纤维蛋白溶解酶活性,故不凝固。由于酶活性的作用,使纤维蛋白以及纤维蛋白原降解为可溶性纤维蛋白,其量远比其他部位的出血为多。月经血中不仅有血纤维蛋白溶酶,还有从子宫内膜来的组织激活酶,后者可以使血中的纤维蛋白溶酶原继续转变为纤维蛋白溶酶。由于月经血中有大量纤维蛋白溶酶,故可利用之以鉴别血迹来源【俊3酥猓褂型过测定血痕中孕激素浓度鉴定月经血的报道【】。虽然上述方法可以解决月经血的检测,但实际上细胞学的检查方法不能区分月经血和阴道出血:精液中也有纤溶酶活性,尸体血与月经血所含可溶性纤维蛋白的量相差无几,检验时需要首先排除检材中混有精液或被尸体血污染的可能因此限