文档介绍：优
秀
毕
业
设
计
论
文
二0 年月
肌原纤维骨架蛋白降解与死亡时间的相关性研究方法结果中文摘要目的研究在死亡早期肌原纤维骨架蛋白降解中的作用;通过组织细胞原位观察、亚细胞水平和分子水平三个层次进行规律性摸索,探讨该规律与死断死亡时间提供新的科学参数。取唤】登褰嗉都彝茫掌ㄈλ溃糜谑椅℃的环境下,肌组织荩浦兀苛椒萦梦⒘孔⑸淦靼ヌ寤亓勘确直鹱⑸涞鞍酌敢行蛋白酶抑制实验。经过组织匀浆、梯度离心、过滤、总蛋白定量等步骤,继而进行甈蚖岷夏汉妥S∧す鄄旄魈醮谋浠第二部分:细胞水平观察降解与死亡时间的相关性。家兔处死后分鍪奔涠稳〔模%中性甲醛固定,随后制成石蜡切片,以小鼠抗兔为一抗,采用ń忻庖咦橹Ч鄄欤猛枷穹治黾际跹罢彝枷竦钠均灰度值与死亡时间之日墓媛尚浴第三部分:亚细胞水平研究肌原纤维小片化指数与死亡时问的相关性。肌组织经过匀浆、梯度离心、总蛋白定量后稀释成/,该浓度下的肌原纤维混悬液于Φ奈庵怠即为所对应时间段下的肌原纤维小片化指第四部分:分子水平研究降解与死亡时间的相关性。取第三部分匀猘作内标进行甈蚖.,后利用凝胶成像系统分析各条带的灰度值和内标之间的比值,继而统计分析和方程回归。薮俗饔谩亡时间之间的相关性,分析此规律用于推断死亡时间的可行性,为法医工作者推在死后不同时间段:,,,,,,,∑浔巢考∪猓照不同死亡时间段分成九组。课题由以下霾糠肿槌桑第一部分:对死亡早期肌原纤维骨架蛋白降解作用的研究。取制剂、蚅以及添加剂,设立对照组,共榻据各种抑制剂所抑制的酶的种类的不同,得出死后早期肌原纤维骨架蛋白主要受的降解。数,继而统计分析该指数同死亡时间之间的关系并进行方程回归。浆后的样品测定蛋白浓度,将各时间段蛋白浓度稀释成统一浓度/,用⑺篮∈保⑸銹组的样品电泳条带情况同空白组一样出现多条新生条带,即、挥跋焖劳鲈缙诘鞍字实慕到猓而槲醇飨孕律醮碙明显影响肌原纤维骨架蛋白的降解;免疫印迹同样提示苊飨砸种芼慕到猓鳳肌原纤维骨架蛋白降解々死亡时间的相关件研究●
关键词结论现不均匀分布;死后小时骨骼肌肌细胞可见较明显的脱颗粒改变,脱颗粒区染色变淡、横纹结构尚清晰;死后小时骨骼肌肌细胞出现较大范围的脱颗粒改变,缺染区横纹结构尚清晰;死后小时大部分骨骼肌肌细胞明显脱颗粒,⑺孀潘劳鍪奔涞难映ぃ霉趋兰〖≡宋∑甘鸾サ纳仙以死后小时内降解速率较快,死亡时间蚆值咝韵喙匦粤己茫速率缓慢,死亡时间和抵涞南咝怨叵挡磺俊⑺孀潘劳鍪奔涞难映ぃ琩痑值逐渐地减小,/值胨劳鍪奔线性回归方程为:.幌喙叵凳机体死后早期,肌原纤维骨架蛋白主要在的作用下发生降解,从而出现较为规律性的变化。免疫组织化学方法在显微镜下观察随着死量变化;采用图像分析技术进行半定量分析能够直观地反映出降解在各时间段上的趋势,而且可进一步对这些数据进行统计分析:肌原纤维小片化指数则在死后小时内表现出同死亡时间之间较为密切的相关性,并且该法取材广泛、操作简便、耗时少,所以该法可适用于较早期死亡时间的快速推断;通过较强的线性关系,此方法适合用于早期的死亡时间推断,但该法操作较为繁琐、耗时较多,今后若能将操作方法和步骤进行进一步的简化,不失为一种较为可靠死亡时间钙中性蛋白酶蛋白质降解肌原纤维小片化指数⑺劳龊小时内,骨骼肌肌细胞横纹结构未见有明显的改变,但染色颗粒整体变淡;死后小时骨骼肌横纹结构清晰,但染色颗粒则出缺染区横纹结构消失。关系数,线性回归方程为:一∈焙蠹≡宋到亡时间的延长在骨骼肌内逐渐减少,能够直观地区分不同时间段间的含技术进行半定量研究的/猘比值与死亡时间之间有的死亡时间推断方法。●肌原纤维骨架堑降解与死亡时问的相关中牛研究
、、℃.、./猘:一.:,.,;,./●肌原纤维骨架蛋白降解与死亡时间的相关中丰研究:、瓼,琲,狿..猘.,甌,產甌:一.
./籥琧琾,.●肌原纤维骨架蛋白降解‘劳鍪蔽实南喙匦匝芯.◆
肌原纤维骨架蛋白的降解与死亡时间的相关性研究前言,是指机体死亡发生时距尸体检查时所经历的时间。死亡时间的准确推断能为刑事案件的侦察提供线索、划定侦察的范围定的作用;同时民事纠纷中的财产继承、保险理赔等方面也时常需要解决死亡时间的推断。因此死亡时间的推断对于刑事和民事案件的解决具有重要的意义,也一直是法医学工作的重点薄在法医实际工作中,人们通常借助于现场勘查、尸体现象的变化规律【、胃内容物消化程度、组织中酶活力的改变’恳约胺ㄒ嚼コ嫜康仁侄瓮贫纤亡时间。但这些传统的方法常常受到不同程度的机体内在和外在的环境因素的影响,例如通过尸温、尸斑等尸体现象推断往往要求尸体保存完好;通过玻璃体钾离子浓度和胃内容等手段需要局部器官的完整性;同时又受到机体胖瘦、衣着情况和环境温度等因素的影响,使得死亡时间的推断存在一定的误差。能否在机体内找出另一种