文档介绍：HPLC法测定6―氨基青霉烷酸中青霉素G含量
摘要:6-氨基青霉烷酸为白色或微黄色结晶粉末,用于制备半合成青霉素的原料。本文采用高校液相测定了6-氨基青霉烷酸中青霉素G的含量,固定相为:苯基柱,乙***∶∶水(15∶10∶75)为流动相,检测波长为220nm,?min-1,柱温:30℃。~?mL-1范围内呈良好的线性关系。%,%(n=6);此方法简便、准确、重现性好,可用于6-氨基青霉烷酸中青霉素G的含量测定。
关键词:6-氨基青霉烷酸;青霉素G;含量
6-氨基青霉烷酸,英文名称为6-Aminopenicillanic acid,为白色或微黄色结晶粉末,微溶于水,不溶于乙酸丁酯、乙醇或***。青霉素G对溶血性链球菌、肺炎球菌、草绿、色链球菌、不产酶金葡菌、白喉杆菌、炭疽杆菌等、脑膜炎球菌、淋球菌等、百日咳杆菌、产气荚膜杆菌、破伤风杆菌、难辨梭菌、乳酸杆菌等具有抗菌作用。青霉素类抗生素的毒性很小,但其青霉素类抗生素常见的过敏反应在各种药物中居首位,表现皮疹、呼吸困难、发绀、血管性水肿、血压下降、昏迷、肢体强直等。6-氨基青霉烷酸用于制备半合成青霉素的原料。国内6-APA的生产一般采用裂解工艺,因此反应中剩余原料青霉素G成为6-APA产品中的主要杂质。本文采用高校液相测定了6-氨基青霉烷酸中青霉素G的含量。
1 仪器与试药
ELGA PURELAB Ultra实验室超纯水系统(天津市劳尔科技有限公司);QUINTIX224电子天平(锡楼兰仪器系统有限公司);VIS-7220N可见分光光度计(北京北分瑞利分析仪器(集团)公司);SY-8100高效液相色谱仪(北京北分瑞利分析仪器(集团)公司);ULABO实验室温度控制器(优莱博技术(北京)有限公司);标准型电化学PH计(上海衡电实业有限公司);超声波清洗器US-6M(中科仪(北京)仪器有限公司);HH-601超级恒温水浴(江苏金坛市亿通电子有限公司)。青霉素G对照品由中国药品生物制品检定所提供。磷酸(上海天普分析仪器有限公司)、冰醋酸(北京市津同乐泰化工产品有限公司)、乙***(济宁汇德化工有限公司)、三乙***(北京市津同乐泰化工产品有限公司)、甲醇(武汉市伟琪博星生物科技有限公司)、磷酸二氢铵(济宁汇德化工有限公司)。
2 含量测定
色谱条件:色谱柱为苯基柱;乙***∶∶水(15∶10∶75)为流动相;检测波长为220nm[1-5]。理论板数按青霉素G峰计算应不得低于2000。
供试品溶液的制备
取6-氨基青霉烷酸,精密称取,精密加入流动相30mL,超声提取30分钟,放冷,过滤,滤液转移至50毫升容量瓶内用流动相定容,摇匀,即得。
对照品溶液的制备
精密称取青霉素G对照品约5mg,,作为对照溶液。
阴性溶液的制备
依照处方取6-氨基青霉烷酸,照供试品溶液的制备方法制成阴性液,依上述方法测定,结果在青霉素G出峰处阴性液无色谱峰,结果阴性试验没有干扰,表明本方法专属性良好。
准曲线的制备
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