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二0 年月
论文作者签名:兰脚日期:三生巡/指导教师签名:氆孟窿’论文作者签名:型亟兰玺期:’垃骸叮赫中国医科大学研究生学位论文独创性声明中国医科大学研究生学位论文版权使用授权书地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说申请学位论文与资料若有不实之处,本人承担一切相关责任。生在攻读学位期间论文工作的知识产权单位属中国医科大学。本人保本人申明所呈交的学位论文是我本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知,除了文中特别加以标注和致谢的含为获得我校或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料,与我一明并表示谢意。本人完全了解中国医科大学有关保护知识产权的规定,即:研究证毕业离校后,发表论文或使用论文工作成果时署名单位为中国医科大学,且导师为通讯作者,通讯作者单位亦署名为中国医科大学。学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅。学校可以公布学位论文的全部或部分内容C内容除外圆捎糜坝⑺跤』蚱渌侄伪4媛畚摹日
小鼠皮肤切创愈合过程中土姿峄疐表达及其时间规律性表化的研究目的·中文论著摘要·皮肤损伤愈合大致分为三个阶段,即炎症期、纤维增生期和组织重建期。多核粒细胞、单核细胞和成纤维细胞参与皮肤损伤愈合的全过程,清除损伤、坏死的皮肤组织和入侵的病原体并重建损伤组织,对于损伤愈合具有重要作用。在炎症期和纤维增生期损伤区内多核粒细胞、单核细胞和成纤维细胞的数量急剧增加;在组织重建期,这三种细胞的数量则显著减少,直至伤口完全愈合。转化细胞时发现的一个主要酪氨酸磷酸化蛋白,是整合素信号转导中的关键分子之一,在细胞粘附过程中发挥着非常重要的作用。当被整合素激活时陨砹酸化,能够直接或者通过相关激酶激活一,刃藕抛5挤肿樱胂赴谝恍┫喙的信号转导途径相联系,参与细胞信号转导过程。这些细胞内分子的相互作用在信号转导途径中调节各种各样的细胞功能,如扩散、迁移、增殖、凋亡和细胞的本研究用免疫组织化学染色技术和过程中土姿峄疐在多核粒细胞、单核细胞及成纤维细胞中的表达,进而探讨通过男藕抛5纪揪都捌渖镅ё饔茫⑻致弁ü觳釬和磷酸化泶锏墓媛赏撇馄し羲鹕耸奔涞目尚行裕徊浇沂镜鞍字实牧姿峄皮肤损伤愈合的影响。粘着斑激酶,渤芇是人们最初在用一猘,蚐存活。方法检测小鼠皮肤切创愈合,
材料和方法⒍锬P偷慕⒓胺肿和磷酸化拿庖咦橹旧法⒀粜韵赴剖治健康成年清洁级昆明系小鼠只,雌雄不限,体重,随机分为组,每组唬渲衛组为正常对照组,其余各组做为实验组。乙醚气体吸入麻醉,剪毛处理,常规手术消毒,在背部中央做一纵行长皮肤全层切口,深达筋膜。创面自然止血,不包扎,不施药。切创后每只小鼠分笼饲养,给予消毒饲料及双、、将小鼠脱颈椎处死,。每组皮肤固定后石蜡包埋,制作厚度连洗涤切片后进行抗原修复,置于微波炉加热至℃,持续,三次、,室温下保湿盒内孵育渭佑每固逑∈鸵:断∈偷耐每剐∈驠或磷酸化嗫寺抗体,保湿盒内孵育过夜;洗涤切片后滴加生物素标记的山羊抗兔固澹J:心诜跤洗涤切片后滴加试剂,保湿盒内孵育洗涤切片后用新配制的陨漳舅睾烁慈緇%,二甲苯透明,中性树胶封片。实验中以娲豢棺饕跣远哉眨醇傺粜浴C孔橥弊鱄旧ā显微镜倍下,在每张切片中随机选择个视野计数包括多核粒细胞、蒸水并保持伤口干燥、防止伤口感染。分别于伤后、、、续切片;另皮肤匀浆,离心,取上清。衅牙%,灭活内源性过氧化物酶,室温的柠檬酸缓冲液中,
实验结果和磷酸化腤检测⑵し羲鹕擞瞎痰牟±碜橹П浠和磷酸化谄し羟写从瞎讨兴鹕饲八鹕酥鼙区的表达单核细胞及成纤维细胞的阳性细胞。计算每个视野中阳性细胞与此三种细胞总数土姿峄疐阳性表达均位于细胞浆,用陨ǔ首鼗粕ā臣蒲Х治各损伤时间组数据应用臣迫砑捎玫ヒ蛩胤讲罘析方法进行统计学处理,数据以繨表示。獗湛乖%脱脂牛奶和%獗找海每剐∈驠或磷酸化嗫寺】固宸跤蚩雇每固宸跤訥为内参;检测土姿峄疐,在允狙粜云状伤后组损伤区出现少量多核粒细胞。组见多核粒细胞数量明显增加。槠は伦橹谟写罅可龅亩嗪肆O赴樗鹕饲写罅康亩嗪肆O赴单核细胞浸润。伤后~以单核细胞和成纤维细胞为主。伤后组表皮增生在对照组中小鼠的表皮、毛囊、皮脂腺、汗腺上皮细胞和血管内皮的比值。峁卸鞍籽局票福鞍锥浚缬荆痩痸】,以标准分子量作指示;S。显色。明显,组完全覆盖伤口。
哳蔕.%琹檠粜韵赴嚷噬呙飨.%,在伤后,阳性细胞比率达到最高.%檠粜韵赴嚷士J枷陆为.%檠粜韵赴嚷氏陆档.%,楦帽率继续下降.%撕阳性细胞比率降到最低.%.%⒀粜韵赴剖巴