文档介绍：摘要
磁性聚合物纳米微球的制备及其在免疫-PCR 中的应用
摘要
磁性聚合物微球是指通过适当的聚合方法将无机磁性粒子包覆
到有机聚合物里面形成的具有一定磁性及特殊结构的微球因为磁性
聚合物微球具有普通高分子微球的众多特性和磁性纳米材料的磁响
应特性因此在生物医学领域显示出了广阔的应用前景
本文针对当前传统单体聚合法制备出的磁性聚合物微球磁含量
低多分散性且主要是微米级产品的研究现状采用改进的间接细乳
液聚合的方法制备出了高磁含量的单分散磁性聚合物纳米微球首
先制备稳定的水基十二烷基磺酸钠(SDS)/油酸双层包覆的磁性 Fe3O4
聚集体分散相再和单体苯乙烯的细乳液共混通过超声二次细乳化
作用使得磁性 Fe3O4 粒子均匀完全包覆到单体苯乙烯液滴里面随后
的聚合得到磁性聚合物纳米微球本方法根据两种细乳液共超声得到
另一种稳定的细乳液的原理可以通过调节磁性 Fe3O4 和单体的重量
比而得到不同包覆量的聚合物纳米微球通过对所制备的磁性聚合物
微球的扫描电子显微镜(TEM)观察动态光散射分析(DLS) 热重分
析(TGA)和磁性性能测试等一系列表征表明了高达 40 的 8 nm 超
顺磁性的 Fe3O4 粒子可以被均一地包覆到聚苯乙烯纳米微球中微球
平均粒径约为 80 nm
在此基础上通过带羧基的引发剂(4’,4’-偶氮二(4’-氰基戊酸)
ACPA)直接在磁性聚合物微球表面上引入功能基团羧基对羧基化的
磁性聚合物微球的静电动力学测试表明微球表面具有弱酸基团的性
质且微球在碱性 pH 下具有良好的胶体稳定性红外图谱证实了微
球表面羧基基团的存在电位滴定法测得其羧基含量为 mmol/g
对微球进行共价偶联抗体实验表明结合抗体仍然具有免疫活性
最后以磁性粒子做为反应载体结合磁性分离操作快速简单的优
点和免疫-PCR 的高灵敏性初步建立了的磁免疫-PCR 技术用于超
灵敏的免疫诊断分析实验中以鼠 IgG 为模式抗原对反应组分中
的链霉亲和素和生物标记的 DNA 使用浓度最优化并确定了所建立
的磁免疫-PCR 对鼠 IgG 的检测极限为 25 fg 比常规的磁 ELISA 提
高了 104 倍达到微量检测的灵敏度
关键词磁性聚合物微球纳米 Fe3O4 粒子细乳液聚合羧基
化免疫-PCR
Abstract
PREPARATION OF IC POLYMER
NANOSPHERES AND THEIR APPLICATIONS IN
IMMUNO-PCR
ABSTRACT
ic polymer microspheres, due to their special properties of
polymer microspheres and rapid ic separation, have been widely
applied to various aspects in biotechnology and biomedicine field, such
as immobilized enzyme, cell separation, protein purification, DNA/RNA
separation, immunoassay, targeting drug.
So far, although numerous polymerization processes, such as
suspension polymerization, emulsion polymerization, microemulsion
polymerization, dispersion polymerization, etc, have been developed to
produce ic polymer microspheres, there are still a lot of problems
needed to be resolved for preparing ideal and useful ic polymer
microspheres. These problems include low ite content, low
efficiency of encapsulation, polydispersity of particle size and big size,
etc.
To avoid these problems and obtain nano-sized ic polymer
spheres with