文档介绍：生育酚简介
又称维生素E,是一种脂溶性维生素,是最主要的抗氧化剂之一。溶于脂肪和乙醇等有机溶剂中,不溶于水,对热、酸稳定,对碱不稳定,对氧敏感,对热不敏感。
维生素E为微带粘性的淡黄色油状物,在无氧条件下较为稳定,甚至加热至200℃以上也不被破坏。但在空气中维生素E极易被氧化,颜色变深。维生素E易于氧化,故能保护其他易被氧化的物质(如维生素A及不饱和脂肪酸等)不被破坏。
维生素E的化学名称为(1)-2、5、7、8-四*** 2-(-4、8、12-三***十三烷基)-6-苯并二氢吡喃醇醋酸酯,分子式为C31H52O3,结构式为:
根据其化学结构可分为生育酚及生育三烯酚两类。生育酚主要有四种衍生物,按***位置分为α、β、γ和δ四种。其中,α-生育酚:R1,R2=CH3;β-生育酚:R1=H,R2=CH3;γ-生育酚:R1=CH3,R2=H;δ-生育酚:R1,R2=H。维生素E以α-生育酚生理活性最高,β-及γ-生育酚仅为α-生育酚的40%和8%。
色谱方法的选择
现行标准中维生素E的检测仅有两个标准——《食品中维生素A和维生素E的测定》(GB/T -2003)和《食用植物油中维生素E组分和含量的测定高效液相色谱法》(NY/T 1598-2008),其中前者介绍了液相色谱法和比色法两种方法。
目前有的文献[1]中指出,气相色谱法虽能正确定量维生素E,但是对不同型分离困难,为了使α-维生素E与β-维生素E及γ-维生素E分离,预先要将试样进行三***硅烷化或酯化,同时胆同醇等硬脂类对测定有干扰。另外,如果前期样品处理不好,很容易对毛细管柱造成污染。故建议使用液相色谱法。
内标法和外标法的选择
两种方法的区别:
内标法
外标法
内标物
与待测物相似,且均出峰
不需要
标准曲线
需要,可两点
需要,需多点
优点
定量准确
操作简便
缺点
不容易选择内标物;操作精度高
与标准品严格相同的操作条件
在《食品中维生素A和维生素E的测定》中采用了内标法,内标物为苯并[a]芘,另外文献中也有使用正三十二烷及十六酸十六醇酯等。《食用植物油中维生素E组分和含量的测定高效液相色谱法》中使用的外标法,国内大多数检测维生素E的文献中都用的是外标法。根据我部门的实际情况,维生素E的检测一般用于豆油脂肪酸的日常检测和协助营销部门的发货定价,故精度要求不是非常高,而内标法每次检测需用到内标物,而内标物的成本通常偏高,因此,外标法可以满足我部门日常检测的需求。
外标曲线
有文献报道[2],随着甲醇浓度的升高,α-维生素E峰形越尖锐,100%甲醇和98:2流动相得到谱图相似,并能与其它杂质峰很好地分离。这是因为对反相柱来说,甲醇是强洗脱剂,其含量越高,流动相的极性越小,洗脱能力越强,α-维生素E越易被洗脱,而其它杂质却被保留;随着水含量的增加,流动相极性增强,对α-维生素E洗脱能力减弱。综合考虑,最终选择98:2的甲醇为流动相。
柱温对保留时间是有影响的,柱温升高,保留时间会减小,对定性造成影响,因此必须设定柱温。
紫外检测器波长一般在290-296nm之间选择。
有文献[3]称,β-维生素E的峰被γ-维生素E峰掩盖,而通过检测,也证实是这样的。因此,利用现有的α-、γ-、δ-维生素E标准品配制成六个浓度点,绘制标准曲线,各曲线