文档介绍：柱色谱
Column chromatography
一、实验要求与目的
1、掌握色谱法的基本原理
2、学会利用柱色谱分离提纯
有机化合物的规范操作
二、实验原理
流动相
1、基本原理:
利用混合物中各组分在某一物质中的吸附或溶
解性能(即分配)的不同,或其他亲和作用的差异,
使混合物的溶液流经该种物质,进行反复的吸附或分
配等作用,从而将各组分分开。
固定相
2、分类: 柱色谱
纸色谱
根据操作条件分为薄层色谱
气相色谱
液相色谱
3、柱色谱(柱层析)
(1)在薄层色谱的基础上,进行混合物的分离
(2)分类:吸附型(Al2O3、硅胶G等作吸附剂)
分配型(硅藻土、纤维素等作支持剂)
(3)吸附柱色谱
1)吸附剂:一般采用表面积很大,经过活化的多孔
性或粉状的固体
氧化铝(酸性、中性、碱性)
a、用前应纯化并在105-110℃,于烘
箱中自然冷却
b、采用勃劳克曼(Brockmann)标准测定法进行
吸附剂活性等级的测定
c、吸附剂用量
被分离样品:吸附剂量=1:30-40或100倍
2)混合溶液1-2ml偶氮苯和苏丹Ⅲ的混合液
3)洗脱剂:a、溶剂的结构与吸附能力的关系
化合物的吸附性与它们的极性成正比即极性大
吸附力强,后洗脱
b、洗脱剂的选择
第一,先极性小的,再极性大的
可以是单一溶剂,也可是混合溶剂
第二,溶剂纯度要高并经干燥过的
4)色谱柱的装填分为: 干法和湿法两种
柱高和柱直径之比= :1
三、装置图
装柱
洗脱
四、主要试剂及其物理常数
偶氮苯
苏丹Ⅲ
中性三氧化二铝
苯
乙酸乙酯
五、实验操作步骤
1、装柱:干法装填,边加边轻敲柱子,注意松紧度
2、混合液的加入:用滴管或量筒沿壁加入
3、洗脱:先用极性小的溶剂洗脱吸附性小的物质,再用极性大的
溶剂洗脱吸附性强的物质。始终保持吸附剂顶部有少量
溶剂,加溶剂时勿将吸附剂冲起
4、产品收集:分