文档介绍：宁夏医科大学学报第卷期
· · 年月
文章编号:———
· 论著·
甲基化在致泡沫细胞形成中作用机制的研究
姜怡邓, 马琳娜, 孙炜炜, 王菊, 梁宇
宁夏医科大学检验学院,银川
摘要:目的探讨低密度脂蛋白受体甲基化在同型半胱氨酸致泡沫细胞形成中的作用机
制。方法原代培养单核细胞,采用佛波酯和—刺激复制泡沫细胞模型,用、、、
干预,油红染色半定量分析泡沫细胞数量,酶免法检测泡沫细胞中—含量;同位素法
测定活性,分析对的影响,巢式降落式~ 法检测甲基化的变化,观察
对的作用。结果泡沫细胞与、、、、培养后,泡沫细胞数量明显增加,细
胞中—含量和活性明显增加,呈低甲基化改变,与对照组比较差异有统计学意义
.,.。结论引起泡沫细胞形成除了氧化应激外,甲基化异常也可能是泡沫
细胞形成和引起的又一重要机制。
关键词:氧化低密度脂蛋白受体;同型半胱氨酸;单核细胞源性泡沫细胞
中图分类号: 文献标识码:
同型半胱氨酸,是动脉粥样—,等。佛波酯
硬化,独立危险因子,在体内,,、胎牛血清杭州四季青,
通过再甲基化和转硫作用两条途径发挥了重胰蛋白酶,同型半胱氨酸,氧化低
要的生物学效应⋯,在形成中,氧化低密度脂密度脂蛋白—酶免测试盒,四
蛋白,—可甲基偶氮唑蓝盐,,二甲基亚
刺激单核细胞转化巨噬细胞最后形成泡沫细胞从枫,,氧化型低密度脂蛋白
而加速了的形成,其中低密度脂蛋白受体北京欣源佳和生物科技有限公司,甲基化
,介修饰试剂盒,,提取试剂
导—进入细胞内进行代谢和降解中起了重盒,德国。
要的作用,但—表达调控中是否涉及到. 泡沫细胞生成的细胞培养及分组
甲基化修饰尚属未知,因此我们选择单核细将肝素化全血以—液作适当稀释后,
胞进行体外培养,探讨不同浓度在泡沫细胞形轻轻叠加在—分层液上面,常规分离
成中引起甲基化变化的作用,以期为致单核细胞,参见文献【。人单核细胞用含%胎
形成的分子机制提供全新的视角和更加深入的牛血清的一培养液,于℃、%的
认识,对相应的干预方案提供实验基础。培养箱中静置培养。将培养好的细胞用洗涤
材料与方法次,以含.% 的胎牛血清一培
. 主要实验仪器和试剂养液稀释细胞密度为×。· 继续培养。以
相差显微镜:由日本公司产品;一型后每隔~换液次,待细胞长满瓶底后,
分光光度计惠普上海分析仪器有限公司产品;.%胰酶消化,以:传代,选用第三代细胞用
多功能真彩图像分析仪北京航空航天大学于实验,再分组干预:①阳性对照组:培养细胞中加
产品;凝胶成像系统:—公司产品;酶标仪入终浓度为.· 的和·
的—;②组;③组;④
收稿日期:——组; 组;且各组均在培养
基金项目:国家自然科学基金项目;宁夏自然科学基金
细胞中加人终浓度为.· 的、
项目;教育部“春晖计划”合作科研项目——
· 的—,并按组别分别加入终浓度为、

作者简介:姜怡邓一,男,湖南人,副教授,博士,主要从事动、、的,各组继续培养。
脉粥样硬化分子机制的研究。—:. . 油红染色和泡沫细胞的半定量
期姜怡邓,.·
,.。采用网上在线://. 与对照组比较.,.
./和设计