文档介绍：第30卷第5期高师理科学刊 Vol. 30
2010 年 9月 Journal of Science of Teachers′College and University Sep. 2010
文章编号:1007-9831(2010)05-0055-03
浒苔水溶性多糖的酶法脱蛋白工艺研究
刁宁宁,于萍,李楠,吴明江
(温州大学生命与环境科学学院,浙江温州 325035)
摘要:选用反应温度、时间、pH、蛋白酶质量分数4个因素进行单因素多水平试验,在此试验的
基础上,按L9(34)正交法,:pH>温度>
酶加入量>时间;最佳酶解脱蛋白工艺条件为:酶解温度50℃、 h、、
g(× 10-7 mol/s·mg-1).
关键词:浒苔;多糖;脱蛋白;蛋白酶
中图分类号:Q539 文献标识码:A doi:.1007-
浒苔( Entermorpha prolifera )为绿藻门石莼目石莼科植物,生于近海潮间带,其自然繁殖能力特别
强,为浙江沿海的优势种,常见的有缘管浒苔、扁浒苔、条浒苔、、蛋白
质、粗纤维、矿物质、不饱和脂肪酸和维生素[1],被作为一种重要的食用、药用藻类[2].现代研究表明,浒
苔多糖具有降血脂、抗氧化、提高免疫力、抗肿瘤等生物活性[3-5],浒苔多糖在医疗和保健领域具有广阔的
开发利用前景.
多糖一般在冷水中溶解度较小,但在热水中溶解性好,,
粗多糖中含有一定量的蛋白质,包括游离的蛋白质,
究和生产的需要,必须将粗多糖除蛋白,,常用脱蛋白的方法有 Sevag
法、三氟三氯乙烷法、三氯醋酸法和酶降解法等[6-7].不同多糖提取物要求脱蛋白的工艺条件有所不同,本
研究以链蛋白酶酶解法对浒苔水溶性粗多糖进行脱蛋白研究,以期确定其最佳工艺条件,指导多糖的纯化.
1 材料与方法
材料
浒苔( Entermorpha prolifera )产自浙江舟山;检测试剂均为分析醇;链蛋白酶(× 10-9
mol/s·mg-1),由 Sigma 公司生产.
方法
多糖质量分数测定方法采用酚-硫酸法[8].
蛋白质质量分数测定方法采用考马斯亮蓝 G-250 染色法测定蛋白质质量分数[9].
浒苔水溶性粗多糖的提取浒苔样品清洗后,风干,切碎,以浒苔与水的质量比为 1∶15 加入蒸馏
水,90℃提取 2 h,过滤,滤渣重复提取 3 ,浓缩,加入 3 倍体积的 95%乙醇,4℃静置过夜,
离心取沉淀得浒苔粗多糖.
酶解脱蛋白的单因素试验分别对酶解温度、酶解时间、溶液 pH 值和酶用量等 4 个因素进行研究,
酶解产物通过醇沉、透析、冻干,得到多糖粉末,测定其中的蛋白质残留量.
收稿日期:2010-07-01
基金项目:浙江省科技计划项目(20