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葛根总黄酮诱导白血病细胞株凋亡及其分子机制的研究方一“血复康”主要组分之一,课题组在临床治疗·论著·旦查痘:鲞旦瘦垫堡兰旦箜垫鲞箜苌望型垡地型诘赝麦眯湍ù澡贰垫:型::堂:牧嫌敕椒和巨眭粒细胞白血病赴闗魑<薄⒙主要药物朱光荣唐宇宏刘佳季建敏章亚成季鸥朱红青邵化敏姜鹏君沈群葛根及其提取物葛根总黄酮,墙帐≈幸皆貉R嚎圃粗萍燎圜旄白血病及相关基础研究取得良好结果的基础上一步分别以急性早幼粒细胞白血病赴闚髓细胞白血病的细胞研究模型,探讨对赴细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响。购自南京泽朗生物公司,纯度为%,溶解于%乙醇中配制成痬⒋嬉海姹存,使用时稀释至所需工作浓度。【摘要】目的探讨葛根总黄酮对慢性粒细胞白血病赴闗图毙栽缬琢O胞白血病赴闚细胞增殖及凋亡的影响。方法采用法检测对细胞、双染法检测细胞凋亡率;染色法分析细胞周期及亚二倍体峰。、一/蛋白表达的变化。、赴鲋场9庋晕⒕导坝ü庀晕⒕迪鹿鄄斓胶斯趟酢⒌蛲鲂√宓比例增加,诒壤陆怠期比例增加。呈时间一剂量依赖性抑制细胞、赴鲋常盏枷胞凋亡。不同浓度干预后细胞鞍姿匠逝ǘ纫览敌韵碌.,,而则无明显变化;泶锍逝ǘ纫览敌陨系鳎籉/表达无明显变化。赴鸍、.,。结论能有效抑制、赴鲋常柚拖赴芷诮蹋盏枷赴蛲觯ǚ肿踊撇煌L崾疽定浓度具有较广谱的抗白血病效应。【关键词】葛根总黄酮;细胞;赴幌赴蛲【】【縁胞的增殖抑制率;光学显微镜及荧光显微镜观察细胞形态改变;ü馊旧獳疨典型的细胞凋亡改变;/一细胞呈时间一剂量依赖性增加;染色法发现细胞亚二倍体及,猰。,現,..;基金项目:江苏省卫生厅“科教兴卫工程”医学重点人才课题唤帐傲笕瞬鸥叻濉钡谖迮卟愦稳瞬畔钅;教育部高校博士点博导类课题作者单位:南京,江苏省中医院血液科旃馊佟⒓窘簟⒄亚成、姜鹏君、沈群荒暇┲幸揭┐笱诳平萄惺唐宇宏、刘佳、季鸥、朱红青、邵化敏通信作者:沈群,/—。瓹:.琍琤...—;;。‘
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峁主要试剂主要方法细胞增殖及凋亡的形态学改变细胞增殖抑制率的改变白血病细胞株细胞凋亡率变化胎牛血清、培养液拦鶪公司籑约梁小瓵疨约梁南京凯基生物公司灰豢笴美国公司琂┒思っ、拦鶥公司跘核糖多聚酶拦鶤公司珹浜翰┦康鹿;一抗狽拦公司珺、、公司估备趸锩标记的浓缩羊抗兔或羊抗鼠抗体拦鶶公司赴暧缮虾=煌ù笱б窖г焊绞羧鸾鹨院惠赠,细胞购自中国科学院上海细胞研究所。细胞接种于含%胎牛血清、/青霉素、/链霉素的培养液中,置℃、罕ズ褪6鹊呐嘌渲信嘌《允て谙胞进行实验。ú舛ㄏ赴鲋骋种坡取对数生长期赴髡赴芏任痬芏冉ù肆街窒赴直鸾种于孔培养板拦,每孔8实验要求加入.、穏/,同时设不加药对照组哉兆及不含细胞的空白组白组孔樯个平行孑7直鹋嘌按说明书每孔加入ぷ饕穕,孵育离心,吸取上清液,再加入振荡器摇匀,酶标仪测吸光度值J笛橹馗次。计算细胞生长抑制率。.,避光置冰上反应,混匀后行觳狻检测凋亡相关蛋白的变化分别收集赴鞔碜椋洗涤,细胞角质蛋白提取液提取总蛋白,妫胄后取上清液。蛋白浓度测定按试剂说明操作,测┲怠R耘QG迩宓鞍为标准样品绘制标准曲线。取獾鞍字恃罚甈缬荆缱R浦罰ぃ%脱脂奶粉封闭后加入一抗,婀梗痪璗春螅