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黄粉虫抗茵肽促细胞凋亡作用及其机制的研究木樊宏英刘颜岗赵瑞君乔丛静申金雁牧嫌敕椒寄生虫与医学昆虫学报抗菌肽对靶细胞的作用机制研究较多,目前认为具体作用机制包括跹Ю淼龋:纬上赴さ缡埔览敌酝ǖ溃抑制细胞呼吸作用;园┫赴羌艿亩狭炎饔茫圆≡搴椭琢鱿赴旧宓挠跋欤抑制蛋白质及细胞壁的合成;种葡赴膜蛋白的合成;盏枷赴蛲觥D壳叭衔抗菌肽对肿瘤细胞最主要作用途径是形成细胞膜电势依赖性通道。此外,线粒体是细胞能量代谢的场所,在细胞生理过程中起着极其重要的作用蹯醯龋。线粒体膜电位的改变一方面可以影响细胞呼吸作用硪环矫婵梢酝ü吡L逋揪队盏枷赴抗菌肽对线粒体作用的研究越来越受到重视。如等发现合成的抗菌肽梢餞肿瘤细胞的线粒体膜电位去极化,进而通过线粒体途径诱导细胞凋亡。卜⑾趾铣傻目咕耐ü用于线粒体引起细胞凋亡。半胱天冬氨酸蛋白酶白娴龋。因此本文通过激光扫描共聚焦显微镜观察本课题组分离纯化的天然抗菌肽刘颜岗等,訩吡L迥さ位的影响,并用检测试剂盒检测凋亡相关蛋白谋泶锴榭觯刺教只品鄢抗菌肽杀伤细胞是由于抗菌肽引起线粒体膜电位的改变而促使细胞调亡,进而导致的表达含量的改变。┫赴芍泄窖Э蒲院北京药物所引进。,姹芄獗4姹赣谩活性检测试剂盒淘铺焐锛际跹芯克。主要设备:激光扫描共聚焦显微镜毡綩公司第卷第痡...山西医科大学寄生虫学教研室,太原;鼗实菏械谌皆骸:颖鼻鼗实摘要为观察黄粉虫抗菌肽对细胞线粒体膜电位及细胞凋亡蛋白半胱天冬氨酸蛋白酶荧光强度,以细胞内荧光强度表示线粒体膜电位大小;其次用觳馐约梁泻兔副暌遣舛↘胞暮俊J笛榻峁允荆咕淖榈腒赴ü馇慷认灾陀诙哉兆,。说明黄粉虫抗菌肽可使细胞线粒体膜电位降低;抗菌肽组暮肯灾哂诙哉兆,,说明黄粉虫抗菌肽可以诱导细胞发生凋亡。结果表明,黄粉虫抗菌肽可以诱导细胞发生凋亡,作用机制是通过降低细胞线粒体膜电位,扰乱其生理功能,促使其凋亡。关键词抗菌肽;线粒体膜电位;幌赴蛲凋亡狝.,R虼耍窍赴蛲鲋械闹匾5蛲鱿喙氐/⒕迪鹿鄄霮赴新薜っ.,.收稿日期:·基金项目:山西省高校科技研究开发项且簧轿魇】萍脊ス叵钅—禾锌蒲Ъ际醴⒄辜苹钅¨通讯作者:甿··。.
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结果樊宏英等:黄粉虫抗菌肽促细胞凋亡作用及其机制的研究,怀ㄒ无锡市超声电子设备厂痪换ぷ魈⊿—州安泰空气技术有限公司籆号嘌拦鶷;自动板式酶标仅黄粉虫抗菌肽的提取:按照刘颜岗等方法从黄粉虫抗菌肽中提取的峰咕肽用于以下实验。细胞线粒体膜电位检测:取对数生长期细胞,调整细胞浓度为×觯痬接种于孔培养板,实验组与对照组每孔5髡抗菌肽的浓度,使其终浓度为斗痬琍6哉兆椋孔樯龈纯祝诺妗%的:温箱中,作用螅尤肼薜っ,使终浓度为痬诺妗%的孪渲蟹跤后收集细胞,吹樱痳,弃上清液,再洗涤离心危尤胧量的⒒煸取N混合液滴于长方形盖玻片上,将玻片置于激光扫描共聚焦显微镜载物台上,在荧光显微镜下初调焦平面,观察细胞状态及罗丹明负载情况。氩离子激光预扫描并设置扫描条件:激发光波长,发射光波长;物镜倍数倍。以细胞内罗丹明荧光强度表示线粒体膜电位C孔槿个样本,每个样本随机选取个视野,取其均数进行统计学分析。.蛲鱿喙氐鞍譪的表达情况检测:将试