文档介绍：二○一○年·第四期研究报告
双羟氟轻松有关物质测定方法研究
夏锦辉 1 王琳 2 赵有杰 3 刘凌 4
( 天津 300193)
( 开封 475000)
( 天津 300350)
( 天津 300457)
摘要目的:用 HPLC 法测定双羟氟轻松的有关物质。方法:Agilent TC-C18 柱为分离柱,
% 的 H3PO4–甲醇(43 ∶ 57)为流动相,流速为 ,检测波长为 241nm。
结果:双羟氟轻松的主峰和杂质峰能有效地分离,重现性良好。双羟氟轻松检测浓度在
~ 范围内与峰面积呈良好线性关系,r = (n=5);检测限分别
为:双羟氟轻松为、中间体 CF11 为、CF12 为、CF13
为。结论:本方法准确、简便、快速、专属性强、重现性好,能很好地控制
双羟氟轻松的质量。
关键词双羟氟轻松有关物质流动相高效液相色谱法
双羟氟轻松为药物中间体,由于在其合成过程松峰分开,调整磷酸的浓度、有机相与水相的比
中可能带进原料、中间体、副产物等杂质,因此例,对色谱条件进一步优化。试验结果表明:在
其质量需要加以控制。本文采用高效液相色谱法, 甲醇-%H3PO4(43 ∶ 57)流动相下,双羟氟
对本品的有关物质进行测定方法研究,建立 HPLC 轻松与杂质峰和中间体 CF11、中间体 CF12、中
测定双羟氟轻松有关物质的方法。间体 CF13 分离良好,因此流动相系统确定为甲
醇-%H PO (43 ∶ 57)。
1 实验材料 3 4
检测波长的确定取双羟氟轻松、中间体
甲醇为色谱纯,磷酸、醋酸均为分析纯。 CF11、中间体 CF12 和中间体 CF13 适量,用流动
双羟氟轻松及中间体 CF11、CF12、CF13 由相溶解并稀释成 ;用 Waters2695 液相色
天津太平洋化学制药有限公司提供。谱仪进行 PDA 测定,双羟氟轻松和中间体 CF11、
CF12、CF13 分别在、、、
2 色谱条件
波长处有最大吸收,双羟氟轻松中未知杂
仪器:Agilent1100 高效液相色谱仪,紫外检质的最大吸收波长(见表 1)。根据主成分、各中
测器;色谱柱:Agilent TC-C18(2),×250mm, 间体、未知杂质的最大吸收波长及响应值,故双羟
5µm;流动相:%H3PO4- 甲醇(43 ∶ 57);流速: 氟轻松有关物质测定的检测波长确定为 241 nm。
;柱温:40℃;检测波长:241nm。表 1 双羟氟轻松中未知杂质的最大吸收波长
编号 1 2 3 4 5
3 实验方法与结果保留时间
最大吸收波长(nm)
方法研究
空白溶剂的测定取流动相适量,按上述
色谱条件与系统适用性试验用十八烷基
色谱条件测定。试验结果表明,空白溶剂不干扰样
硅烷键合硅胶为填充剂;甲醇-% 磷酸溶液
品测定。
(43 ∶ 57)为流动相;检测波长 241nm。理论板数
双羟氟轻松和中间体的分离考察分别取
按双羟氟轻松峰计算为 14775。
双羟氟轻松和中间体 CF11、中间体 CF12、中间体
流动相的选择采用 Agilent TC-C18(2) 柱
CF13,按上述色谱条件测定,色谱峰保留时间(见表 2)。
为分离柱,考察甲醇- 磷酸溶液、甲醇- 醋酸溶
分别取双羟氟轻松和中间体 CF11、CF12、
液作为流动相系统。试验结果表明,选用甲醇-
CF13 适量, 混合均匀, 按上述色谱条件测定,
磷酸系统为好。为使杂质峰及中间体和双羟氟轻
HPLC 色谱图(见图 1)。
21
现代仪器() 二○一○年·第四期
表 2 双羟氟轻松和中间体色谱峰的保留时间 RT 表 3 双羟氟轻松峰面积和浓度的线性关系试验
名称双羟氟轻松中间体 CF11中间体 CF12中间体 CF13 编号浓度(µg/mL) 积分面积(A)
1