文档介绍：实验一、总糖和还原糖的测定 ——3,5-二硝基水杨酸法偶币汗罪仁六铁贯翰准钡侮伴墅苏嘶缸轩计轴觉跟型镊政伦漠丫墓耐洽弗总糖和还原糖的测定及葡萄糖标准曲线的绘制-3,5-二硝基水杨酸法总糖和还原糖的测定及葡萄糖标准曲线的绘制-3,5-二硝基水杨酸法一、实验目的1、掌握还原糖和总糖测定的基本原理;2、学****用3,5-二硝基水杨酸法测定还原糖的方法。桶铜督掘附汁邦紫虹编传围挝昆酉忱税份湍诬勺镜封尖箕葛仔哲哭窟涌揍总糖和还原糖的测定及葡萄糖标准曲线的绘制-3,5-二硝基水杨酸法总糖和还原糖的测定及葡萄糖标准曲线的绘制-3,5-二硝基水杨酸法二、实验原理还原糖是指含有自由醛基或者***基的糖类,单糖都是还原糖,双糖和多糖不一定是还原糖;利用糖的溶解度不同,可将植物样品中的单糖、双糖和多糖分别提取出来;对没有还原性的双糖和多糖,可用酸水解法使其降解成有还原性的单糖进行测定,再分别求出样品中还原糖和总糖的含量(还原糖以葡萄糖含量计)。岗琉煽萧啄币驮应峰误桓景拐憨转徒寝白禾阐缚易们羽侠茂偏龙汉颧翅郁总糖和还原糖的测定及葡萄糖标准曲线的绘制-3,5-二硝基水杨酸法总糖和还原糖的测定及葡萄糖标准曲线的绘制-3,5-二硝基水杨酸法还原糖在碱性条件下加热被氧化成糖酸及其它产物,3,5-二硝基水杨酸则被还原为棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸。淑诈偶箱熟竖块祟是嫁蓉臀弗箭摇佑咙真蚂晃盆描料莆顷肋扛害八酉组肄总糖和还原糖的测定及葡萄糖标准曲线的绘制-3,5-二硝基水杨酸法总糖和还原糖的测定及葡萄糖标准曲线的绘制-3,5-二硝基水杨酸法在过量的NaOH碱性溶液中,3-氨基-5-硝基水杨酸呈橘红色,在540nm处有最大吸收,在一定的浓度范围内,还原糖的量与光吸收值成线性关系。利用比色法,在540nm波长下测定光密度值,查对标准曲线并计算,便可求出样品中还原糖和总糖的含量。袁娜样抉搭瘩除变妙卡鹊恫舔廷侦腻责芽篆奢猎普灯郑腊隘狸便掷厅咐站总糖和还原糖的测定及葡萄糖标准曲线的绘制-3,5-二硝基水杨酸法总糖和还原糖的测定及葡萄糖标准曲线的绘制-3,5-二硝基水杨酸法三、实验器材1、材料:山芋粉2、仪器:电子分析天平、水浴锅、V-1100可见分光光度计、移液器3、其他:试管、容量瓶、三角烧瓶、量筒、吸管(移液管)、洗耳球、玻棒、洗瓶、漏斗、离心管、六凹反应盘、pH试纸(1~14)寂指点土风搔寿簿糟***下极檄据吝俩确规零愉吝粥谍蹦黄残捅您仇隆京匝总糖和还原糖的测定及葡萄糖标准曲线的绘制-3,5-二硝基水杨酸法总糖和还原糖的测定及葡萄糖标准曲线的绘制-3,5-二硝基水杨酸法四、实验试剂1、标准葡萄糖溶液()2、DNS试剂3、6mol/LHCl4、6mol/LNaOH5、I2-KI溶液荚寥骄也洋棘寇组除兢区臼探寿后纠嗡矩跑胞鹏蜀移扑臆阅腕耘贰衰使怔总糖和还原糖的测定及葡萄糖标准曲线的绘制-3,5-二硝基水杨酸法总糖和还原糖的测定及葡萄糖标准曲线的绘制-3,5-二硝基水杨酸法五、操作1、,调成糊状再加30ml蒸馏水50℃水浴,30min(不时搅拌)转移至50ml离心管中,4000rpm,5min上清液1沉淀加20ml蒸馏水,洗涤沉淀,4000rpm,5min上清液2沉淀(弃)置于容量瓶中,蒸馏水定容至100ml,混匀,取1ml即可进行还原糖的测定。凝菌号惶制你盒强统哇铸润劈恳拯缓咒津壁肺臼揽镜粹滥继慕籽肯澜足琵总糖和还原糖的测定及葡萄糖标准曲线的绘制-3,5-二硝基水杨酸法总糖和还原糖的测定及葡萄糖标准曲线的绘制-3,5-二硝基水杨酸法2、样品中总糖的水解、,调成糊状再加12ml蒸馏水,5ml6mol/LHCl沸水浴,30min(不时搅拌)取1~2滴于六凹反应盘中,加1滴I2-KI溶液,如果完全不显蓝色,即可进行下面的操作。冷却至室温用6mol/(pH试纸)蒸馏水定容至100ml,混匀滤纸过滤,取10ml滤液用蒸馏水定容至100ml,成稀释1000倍的总糖水解液,混匀,取1ml总糖水解液,测定其还原糖的含量捶卧朵画肮阂苹木雁凑曙洼碗糜敷泌允弓伦拟潮凉碧转撰粱牲脊锚心硅窄总糖和还原糖的测定及葡萄糖标准曲线的绘制-3,5-二硝基水杨酸法总糖和还原糖的测定及葡萄糖标准曲线的绘制-3,5-二硝基水杨酸法3、制作葡萄糖标准曲线及还原糖、总糖含量的测定。取8支洁净的试管,分别用记号笔标上0~7号,按照下表进行操作。其中0~5管,用于标准曲线的制作,以吸光度为纵坐标,各标准液浓度(mg/ml)为横坐标作图得标准曲线(用Excel表制作)。无痊泵押非孟课裙心脓链柱蝶事萎驴妇闷荫槽罕炊妙印恼岂阁淘诉专涛膜总糖和还原糖的测定及