考马斯亮蓝快染.doc

文档介绍：考马斯亮蓝快染 用该方案可以在加入染色液后5-10min内得到染色的蛋白质条带。该方案背景低,但没有基本方案1敏感。材料:异丙醇固定液,考马斯亮蓝快染液,10%(v/v)乙酸。步骤:将聚丙烯酰***凝胶放在塑料或玻璃容器并以3-5倍体积的异丙醇固定液覆盖,室温下缓慢摇动10-15min()或30-60min();倾去固定液,以考马斯亮蓝快染液覆盖凝胶,室温下快速摇动直至得到想要的亮度(2h至过夜);倾去染色液,以10%乙酸覆盖凝胶,室温下缓慢摇动≥2h,直至得到干净的背景。如需要,换新的10%乙酸;保存;拍照或干燥凝胶。异丙醇固定液:25%异丙醇,10%乙酸,65%水,室温长期保存;快速考马斯亮蓝染色液:10%(v/v)乙酸,%(m/V)考马斯亮蓝G-250,90%水,室温长期保存;考马斯亮蓝染色液:%(v/v)考马斯亮蓝R-250染色液。但是,在加乙酸和水(一般不必过滤)之前应将考马斯亮蓝R-250溶于甲醇。室温下溶液可保存6个月。如果随保存时间延长出现沉淀,可过滤去除沉淀获得均一的溶液。脱色液:5%(v/v)甲醇,7￥(v/v)乙酸,88%水,室温下可保存1个月。