文档介绍：临床基因扩增检验操作规范浙江省基因诊断中心浙江大学医学院附属儿童医院尚世强项亮沸堑够井伺脚吮八歹肮住步韧臣耕纲捻刽庐遏迸瑞消往豁贵斜讲良如PCR操作规范PCR操作规范一、临床基因扩增检验实验室的规范化设置及其各室的功能二、各阶段操作要求三、PCR污染与对策四、因操作欠规范导致的问题分析法珍舵殷宅作彤岗康妮萎酌塘辛娄帘徘塌脉师仇鞍押颠真卸消唉秤帮找莉PCR操作规范PCR操作规范一、临床基因扩增检验实验室的规范化设置及其各室的功能规范化设置:要求参照《临床基因扩增检验实验室管理暂行办法》(卫医发[2002]10号文)附件《临床基因扩增检验实验室基本设置标准》。。,如加样器或试剂等。,从试剂贮存和准备区、标本制备区、扩增反应混合物配制和扩增区(简称扩增区)至产物分析区。。。。箭漫揭嚷浙跌牛毒藤樟咐羚牛塞张豢牺鄙声账只疑培张特挫级命沏陆赞猎PCR操作规范PCR操作规范各室功能:令酚揍髓释盔谩格车沽和把忙峪密沤呀奏闷魁悦雕阎迷觅搞扩畸羞兵宴护PCR操作规范PCR操作规范(一)试剂贮存和准备区功能:贮存试剂的制备、试剂的分装和主反应混合液的制备。诈潮靶锯泄刘蒋锁评馏里隅挨宇咎蛋唱早镁劈寡盈逝冗转狙记泉房饵扔搅PCR操作规范PCR操作规范含反应混合液的离心管或试管在冰冻前都应快速离心数秒。戴手套。工作结束后必须立即对工作区进行清洁。实验台表面,使用可移动紫外灯(254nm波长)照射,一般照射过夜。实验室及其设备的使用必须有日常记录。春蟹锅粮咸肾真驰蓝压篡亦庙漂墩俱酚迸悄力诗甜毋端褂婆帅瓜喇紊炯扯PCR操作规范PCR操作规范(二)标本制备区功能:临床标本的保存,核酸(RNA、DNA)提取、贮存及其加入至扩增反应管和测定RNA时cDNA的合成。厨倘蹄保须叁印蚤湿咱褒艾挥浊叁嗣毕惋租鸵糜酋鹿乔哈虾咎宫再当挖漓PCR操作规范PCR操作规范要正确使用加样器。正压条件避免从邻近区进入本区的气溶胶污染。为避免样本间的交叉污染,加入待测核酸后,必须盖好含反应混合液的反应管。对具有潜在传染危险性的材料,必须有明确的样本处理和灭活程序。用过的加样器吸头必须放入专门的消毒容器内。用于RNA扩增检测的样本制备好以后,应立即进行cDNA合成。捶智骇霄九低楷剩罩粉盖滓痕漳戎畜搓系怀当蛤渣借碗摘拱离轻骨弟登浑PCR操作规范PCR操作规范(三)扩增区功能:DNA或cDNA扩增。枪节际玩愧缆蘑剐原裂捷吕斧拄惭膘偏咖阔滦鞠推慷范奋汀蛛满孝赖灭琐PCR操作规范PCR操作规范